[發明專利]一種微生物檢測方法在審
| 申請號： | 201710795218.4 | 申請日： | 2017-09-06 |
| 公開（公告）號： | CN108950060A | 公開（公告）日： | 2018-12-07 |
| 發明（設計）人： | 梅婷;曾令文 | 申請（專利權）人： | 武漢中科志康生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 武漢今天智匯專利代理事務所(普通合伙) 42228 | 代理人： | 鄧寅杰;嚴超 |
| 地址： | 430000 湖北省武漢市東湖高新區高*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 微生物 微生物檢測 復合體 靶標微生物 磁珠微球 核酸序列 標靶 抗體 檢測 細菌基因組 抗體標記 特異識別 外源核酸 病原體 復合物 磁珠 構建 擴增 偶聯 脫附 外源 吸附 制備 蛋白 細菌 病毒 細胞 | ||
1.一種微生物檢測方法，其特征在于包括以下步驟：
1），構建抗體標記磁珠微球，將所需檢測的標靶微生物抗體與磁珠微球結合，形成復合體；
2），配置特異微生物識別靶標，該微生物識別靶標能與靶標微生物結合，形成帶有外源核酸的復合物，將步驟1）產物與其偶聯，形成微生物-抗體-磁珠復合體；
3），將標靶微生物與步驟2）所得的復合體混合，使標靶微生物的特定核酸序列與復合體吸附，吸附完成后分離出吸附特定核酸序列的復合體；
4），采用磁性分離的方法，將步驟3）所得的復合體中特定核酸序列分離；
5），擴增步驟4）所得的特定核酸序列，而后檢測，得到標靶微生物的檢測結果。
2.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述靶標微生物可以是細菌、病毒、病原體、細胞或蛋白。
3.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟1）中，磁珠微球直徑為20-25nm。
4.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟1）中，抗體可以是一種或多種。
5.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟3）中，偶聯采用EDC和/或NHS方法進行偶聯。
6.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟4）中，分離出吸附特定核酸序列的復合體采用超濾管純化的方式。
7.根據權利要求1所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟6）中，采用PCR或SDA法進行擴增。
8.根據權利要求1~7任意一項所述的微生物檢測方法，其特征在于：所述步驟6）中，采用熒光定量PCR法或核酸膠體金檢測卡對擴增后的核酸序列檢測。
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