[發明專利]一種自身免疫性糖尿病檢測用反應膜條、制備和使用方法

在審

• 申請號: 201710793219.5
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107449904A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 胡鹍輝;王棟凱;劉堯;林俊;鄭燕萍
• 申請（專利權）人: 深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司;深圳市藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司44218
• 代理人: 胡堅

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及一種自身免疫性糖尿病檢測用反應膜條、制備和使用方法。

背景技術

人體免疫系統的主要功能是識別和清除抗原性異物。正常情況下，機體對自身組織成分一般不會產生免疫應答，稱為免疫耐受。一旦這種耐受被打破，就會發生自身免疫性疾病。自身免疫性疾病突出表現為血清中多種自身抗體的形成及全身多臟器損傷。在自身免疫性疾病中，自身免疫性糖尿病較常見。

糖尿病主要依據其病因學的不同而進行分型，其中免疫介導的1型糖尿病，患者血清中可檢測到針對胰島β細胞的自身抗體，是存在免疫損害的有力佐證。雖然在過去的數十年中，人們在患者血清中發現了多種自身抗體，但目前認為主要以胰島細胞抗體（ICA）、谷氨酸脫羥酶抗體（GAD）、胰島素自身抗體（IAA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA-2A）、鋅轉運蛋白8抗體（Znt-8A）、人類重組酶（E2L3）、真核翻譯延長因子（EEF1A1）、羧基肽酶H抗體（CP-HA）、SOX13抗體（SO-XA）等，這些特異性自身抗體是自身免疫性糖尿病診斷標準中重要的組成部分。

谷氨酸脫羧酶(GAD)是人及動物體內抑制神經遞質γ-氨基丁酸的合成酶。1型糖尿病是遺傳易感個體通過自身抗原介導的免疫反應所引起胰島β細胞破壞的自身免疫性疾病，GAD是此免疫反應關健的始動靶抗原，因此GAD-Ab是糖尿病前期個體較特異的免疫指標。GAD-Ab的測定意義為：①可作為1型糖尿病的預測；②從2型糖尿病患者中鑒別遲發型1型糖尿病，此類患者常可出現GAD-Ab的高水平，并穩定維持，可考慮早期干預治療；③可作為普查手段，以發現1型糖尿病的高危人群和個體。

胰島素自身抗體（IAA）出現在未使用過外源性胰島素或使用時間不超過7-10天的個體中產生針對內源性胰島素的自身抗體，與年齡呈負相關，隨著增齡，IAA陽性率呈現下降趨勢，被認為是持續時間最短的抗體。IAA單獨測定意義不大，但與ICA、GAD等聯合檢測，可增加對1型糖尿病的預測程度。

胰島細胞抗體(ICA)為抗胰島β細胞所有抗體的總稱。目前認為，ICA陽性預示β細胞的自身免疫損害，只能作為糖尿病的高危指標。在兒童陽性或高水平持續陽性，對l型糖尿病才具有較高的預測率。

蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA-2A）特異性較強，在不伴有1型糖尿病的自身免疫患者中較少發現。可作為1型糖尿病高危人群篩查指標。

鋅轉運蛋白8抗體（Znt-8A）具有高度的β細胞特異性，鋅轉運蛋白8（Znt-8）抗原是通過影響鋅離子濃度而在胰島素合成和分泌中發揮重要作用，對糖尿病自身抗體免疫介導的1型糖尿病有著重要的診斷和預測價值。特別是其他自身抗體陰性的患者有著重要的診斷價值。

人類重組酶（E2L3）以及真核翻譯延長因子（EEF1A1）分別參與蛋白質的翻譯和退化，EEF1A1與felty綜合征有關，一種自身免疫性疾病。UBE2L3有自身免疫性疾病如類風濕性關節炎、克羅恩病和系統性紅斑狼瘡有關，蛋白質體內平衡與這些自身抗體有關，可以反映出T1DM的自身免疫。相應的兩個自身抗原免疫熒光染色胰腺，結果抗原都結合在胰腺胰島β-cells而不是腺泡細胞和a-cells。這兩個新穎的自身抗體可以添加一個新維度的診斷、分類、治療和1型糖尿病的發病機理。

幾種抗體聯合檢測可提高1型糖尿病的診斷敏感性和診斷符合率,對1型糖尿病早期診斷具有重要價值。

另外，世界衛生組織在對糖尿病分型的新建議中提出，成人隱匿性自身免疫糖尿病（LADA）屬于1型糖尿病的亞型，與1型糖尿病的自身免疫發病機制相同。胰島自身抗體為目前診斷該疾病的主要依據。

羧基肽酶位于胰島細胞分泌顆粒及神經內分泌細胞，是與肽類激素和神經遞質的產生有關的一種糖蛋白酶可催化胰島素原向胰島素的轉化。羧基肽酶H抗體（CP-HA）對成人隱匿性自身免疫糖尿病（LADA）有診斷價值。

SOX13抗體（SO-XA）誘發的自身免疫反應可發生于GAD-Ab和CP-HA均陰性的DM患者在，SO-XA的檢測可以提高診斷LADA的敏感性，SO-XA陽性患者具有病程長、臨床多樣等特點。

GAD、CP-HA、SO-XA等是診斷LADA的主要傳統學指標。

本發明的自身免疫性糖尿病免疫印跡檢測試劑盒可針對自身免疫性糖尿病的9種抗體同時進行檢測，從而使得我們該類患者的病況有了更快速、直觀、準確、全面的判斷，利于對患者進行及時的診斷和正確的治療，減少和延緩糖尿病并發癥的發生和發展。

發明內容