[發明專利]一種提高慶大霉素發酵單位及改變其組分組成的補料方法

有效

• 申請號: 201710791469.5
• 申請日: 2017-09-05
• 公開（公告）號: CN107523597B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 李繼安;林惠敏;何強;王鐵柱;張會敏;盧雪歡;徐魯;張建斌;李亞軍;鄧旭
• 申請（專利權）人: 河南仁華生物科技有限公司;上海醫藥工業研究院
• 主分類號: C12P19/48
• 分類號: C12P19/48
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 張隨

本發明涉及一種提高慶大霉素發酵單位及改變其組分組成的補料方法，屬于發酵工程領域，該方法是在經種子培養后的發酵培養過程中實施，在不同時間段共進行四次補料，每次補料補入補料培養基，從在100L發酵罐中發酵培養開始時計時，四次補入的時間及其補入量分別為：20?24h補2.4?4.2 L、35?40h補2.4?4.2 L、46?50h補1.85?3.25 L、55?65h補1.85?3.25 L；在發酵過程中適時補水以控制發酵液體積與初始發酵時一致。該補料方法使發酵效價明顯提高、黏度降低、放罐發酵液濾速提高，而且各組分比例較為理想，同時工藝簡單有效，染菌概率降低，適用于工業化生產。

技術領域

本發明屬于發酵工程領域，具體涉及慶大霉素的發酵生產，特別是涉及一種提高慶大霉素發酵單位及改變其組分組成的補料方法。

背景技術

慶大霉素是由放線菌屬絳紅小單胞菌、棘孢小單胞菌等小單胞菌發酵產生的氨基糖苷類廣譜抗生素，主要用于敏感菌所致的嚴重感染，如新生兒膿毒癥、中樞神經系統感染、尿路感染、呼吸道感染、肺炎、胃腸道感染的等，在臨床中具有廣泛的應用。其中以C族復合物（C1、C2、C1a、C2a）為主，其主要作用的C族復合物由于在化學結構上的差異，生物活性和毒性也不相同。提高其發酵單位，改變其組分生成是目前研究工作中一個重要熱點。

在范一文等公開發表的“間歇補料對小單孢菌產慶大霉素的影響”一文中，雖然通過改變補料方式，效價雖然有所提高，但是，也存在幾個問題：其一： 其研究通過一直流加氨水維持發酵液的PH，在發酵初級代謝產酸階段過多地引入銨離子，導致氨基氮水平在發酵過程中持續偏高，抑制菌絲由初級代謝轉入次級代謝，從而致使慶大霉素發酵水平不能有效提高；其二：其研究單一的補入碳源，缺少有機氮源的引入；其三：其研究中基礎發酵培養基碳氮源濃度較高，使得發酵前期由于營養基質濃度過高而抑制菌體生長，前期菌濃增長緩慢，同時抑制了次級代謝的有效進行，使發酵起步效價偏低。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的在于提供一種提高慶大霉素發酵單位及改變其組成成分的補料方法，通過優化慶大霉素的原始補料工藝，提高慶大霉素的發酵單位，優化組分組成，簡化生產操作，降低生產成本，更易于工業化生產。

一種提高慶大霉素發酵單位及改變其組分組成的補料方法，其是在經種子培養后的發酵培養過程中實施，其中，在發酵培養過程中的四個時間段共進行四次補料，每次補料補入補料培養基，從在100L發酵罐中發酵培養開始時計時，四次補料補入的時間及其補入量分別為：20-24h補2400-4200mL、35-40h補2400-4200mL、46-50h補1850-3250mL、55-65h補1850-3250mL；

在發酵培養過程中適時補水以控制發酵罐內發酵液體積與初始發酵時一致。

進一步的，所述四次補料補入的時間及其補入量分別為：20-24h補3000-3500mL、35-40h補3000-3500mL、46-50h補2300-2700mL、55-65h補2300-2700mL。

進一步的，所述四次補料補入的時間及其補入量分別為：20-24h補2400-2800mL、35-40h補2400-2800mL、46-50h補1850-2150mL、55-65h補1850-2150mL。

進一步的，所述四次補料補入的時間及其補入量分別為：20-24h補3600-4200mL、35-40h補3600-4200mL、46-50h補2750-3250mL、55-65h補2750-3250mL。

進一步的，所述補料培養基中所含成分的濃度以g/100mL計，則所含成分及其濃度分別為：玉米淀粉為5.6-8.4、玉米粉為1.68-2.52、大豆蛋白胨為1.76-2.64、冷榨豆粉7.04-10.56、醋酸鈉為0.2、硫酸銨為0.16、硝酸鉀為0.034、碳酸鈣為0.7、氯化鈣為0.1、氯化鈷為0.004 、淀粉酶為0.004、泡敵為0.03和有機硅油為0.02，PH 7.6。