[發明專利]一種同時檢測尿液中毒死蜱3種代謝產物的方法及裝置

有效

• 申請號: 201710791288.2
• 申請日: 2017-09-05
• 公開（公告）號: CN107389829B
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發明（設計）人: 徐懷洲;吉貴祥;張圣虎;張芹;韓志華;宋寧慧;吳晟旻;劉濟寧;石利利
• 申請（專利權）人: 環境保護部南京環境科學研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 北京棧橋知識產權代理事務所(普通合伙) 11670
• 代理人: 劉亞娟

本發明公開了一種同時檢測尿液中毒死蜱3種代謝產物的方法及裝置。所述方法包括以下步驟：(A)目標化合物選擇：3,5,6?三氯?2?吡啶醇、磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯；(B)樣品酶解；(C)樣品提取；(D)樣品凈化與濃縮；(E)儀器分析：所述裝置主要包括：主體和色譜－離串聯質譜檢測儀，所述主體內包含電源裝置、解凍裝置、離心裝置一、水浴裝置、渦旋混合裝置、離心裝置二、凈化裝置、旋轉蒸發裝置、PLC控制器。本發明的裝置具有簡潔快速的優點，實現了智能化控制，可控性強，準確度高。本發明的方法大大提高了檢測的有效性和可靠性，節省了檢測時間和檢測費用。

技術領域

本發明涉及農藥檢測技術領域，具體是涉及一種同時檢測尿液中毒死蜱3種代謝產物的方法及裝置。

背景技術

毒死蜱屬于一種廣泛用于農作物多種病蟲害防治的廣譜性有機磷殺蟲劑。毒死蜱是我國殺蟲劑市場的主導農藥品種，在世界上的生產量和使用量也居高不下。毒死蜱可通過食物、空氣、土壤等介質暴露進入人體。

毒死蜱可抑制膽堿酯活性，而中樞神經系統的乙酰膽堿酯酶對維持中樞神經系統神經細胞的發生和成熟具有重要作用。越來越多的研究證實毒死蜱對發育期的中樞神經系統存在慢性毒性作用，與兒童注意多動缺陷障礙、記憶力減退、認知障礙等相關。歐美等發達國家對毒死蜱污染對兒童的智力與生長發育影響給予了高度關注。環境污染帶來的健康風險一直以來就是人們關注的焦點，人體內暴露水平是確定環境污染物人體負荷濃度的關鍵指標，也是最直接的指標。部分有機污染物進入人體后會發生代謝，產生多種代謝產物，準確定量污染物的內暴露，須同時測定該物質的多種代謝產物。

2016年《職業衛生與應急救援》第34卷第4期278-281頁中介紹了一種使用氣相色譜法測定血漿中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，本法對3,5,6-三氯-2-吡啶醇檢出下限為3μg/L。2015年《理化檢驗-化學分冊》第51卷第9期927-931頁中介紹了一種利用氣相色譜串聯質譜法對魚肉中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的分析方法，線性范圍為1.0～1000μg/L，檢測下限0.3μg/kg。2015年《環境污染與防治》第37卷第9期80-83頁中介紹了一種利用雙(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺進行衍生化，測定毒死蜱及其代謝產物的方法，主要使用固相萃取富集，利用氣相色譜質譜聯用方法測定水樣中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，檢出限為0.100μg/L。2016年《中國職業醫學》第43卷第5期590-596頁中介紹了一種利用超高效液相色譜對血漿中3,5,6-三氯-2-吡啶醇進行檢測的方法，線性范圍為1.00～50.00mg/L，檢出限為0.30mg/L。2013年《色譜》第31卷第9期903-907頁中介紹了一種利用超高效液相色譜-串聯質譜法測定人尿中3,5,6-三氯-2-吡啶醇的方法，方法檢出限為0.41μg/L。

綜上所述，已有的文獻報道主要針對血漿、水樣中的毒死蜱代謝產物，尿液中毒死蜱代謝產物的檢測方法研究較少，且僅關注3,5,6-三氯-2-吡啶醇一種代謝產物。然而，毒死蜱進入人體后，在體內發生代謝產生3,5,6-三氯-2-吡啶醇之外，還會產生磷酸二乙酯、硫代磷酸二乙酯等2種重要的代謝產物，同時快速準確地定量測定尿液中毒死蜱3種代謝產物是準確衡量毒死蜱人體內暴露的前提條件，對于準確定量毒死蜱的人體負荷具有重要作用。

且以往的方法中使用的氣相色譜-火焰離子化檢測器、氣相色譜-電子捕獲檢測器、氣相色譜-氮磷檢測器、高效液相色譜-紫外檢測器等，對于同時檢測3種毒死蜱代謝產物方面，在面對背景復雜、干擾物質多時，無法準確定性定量，甚至出現假陽性結果，遠遠無法對人體樣本(如尿液、血漿)中痕量毒死蜱代謝產物的分析監測要求。

發明內容

本發明解決的技術問題是針對當前人體尿液中毒死蜱代謝產物同時檢測的方法匱乏，本發明提供一種同時定量尿液中毒死蜱3種主要代謝產物的檢測方法，建立了毒死蜱3種代謝產物尿液樣品檢測的酶解、提取、凈化與濃縮的方法，同時建立并優化了3種主要代謝產物同時檢測的高效液相色譜和二級質譜(MS/MS)檢測方法。

本發明的技術方案是：