[發明專利]一種發酵提取油橄欖葉生物活性物質的方法

在審

• 申請號: 201710789257.3
• 申請日: 2017-09-05
• 公開（公告）號: CN107467665A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 劉青亞
• 申請（專利權）人: 安徽華健生物科技有限公司
• 主分類號: A23L33/105
• 分類號: A23L33/105;A23L33/135;A23L33/14;A23F3/34
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產權代理有限公司34112
• 代理人: 余成俊

技術領域

本發明涉及一種從油橄欖葉中提起活性物質的方法，具體涉及一種發酵提取油橄欖葉生物活性物質的方法。

背景技術

油橄欖是世界上具有悠久歷史的一種著名的樹種,被譽為世界稀缺高價值資源。油橄欖果實核小、肉厚、含油多,是提取橄欖油的良品，具有較高的使用價值。相對于具有稀缺性的橄欖油，油橄欖葉產量較大，綜合利用潛力大，隨著現代提取工業及分析技術的發展,從油橄欖葉中分離出多種生物活性成分,如裂環烯醚萜類、黃酮類、甾醇、烷烴類及揮發性成分等。研究表明油橄欖葉提取物具有抗氧化、降血糖、降血壓、抗菌抗病毒、抗癌、保護心腦血管等作用。在國外，油橄欖葉及其提取物的保健產品在國外已得到較為充分的開發利用，國內市場也開始出現一些以油橄欖葉及其提取物為原料的保健茶、保健食品及其他保健產品。

目前制備油橄欖葉提起物的方法主要是通過熱提取、超聲波輔助提取、微波輔助、超臨界CO₂提取等手段，這些處理方法存在耗能大、耗材多、耗時長、破壞成分、提取率低等缺陷，不利于企業經濟效益和產品競爭力的提高，急需研發更為高效的提取手段。

利用微生物發酵炮制中藥的方法古已有之，并且是一種相當重要的炮制加工方法，藥物里面的活性成分在發酵過程中利用微生物的轉化能力來達到改變藥性、提高藥效、降低毒副作用等功效。《發酵輔助提取對三七總皂苷提取物生物活性的影響》一文揭示了發酵處理能提高三七中有效成分的溶出，稀有皂苷成分增加，清除自由基及抗菌能力更佳，由此表明利用微生物發酵轉化技術在生物活性成分提取方面有極大的應有價值。目前油橄欖葉的發酵處理也有一些報道，但是只局限于生產飼料和釀制橄欖酒，經濟價值不高。

發明內容

本發明針對已有提起技術的缺陷，提供一種發酵提取油橄欖葉生物活性物質的方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種發酵提取油橄欖葉生物活性物質的方法，包括以下步驟：

（1）挑選新鮮健康的油橄欖葉，清洗干凈后陰干至含水量≤10%，隨后進行粉碎處理，過50目篩，所得粉料滅菌處理后與碳源、氮源、麥芽汁、纖維素酶混勻，接種種子液，在30-35℃條件下發酵10-15天；

（2）發酵結束后過濾留清液備用；

（3）將步驟（2）得到的液體經真空濃縮處理，產物在60-65℃條件下干燥滅活，即得油橄欖葉生物活性提取物。

所述的步驟（1）中粉料、碳源、氮源、麥芽汁、纖維素酶、種子液的重量比為1:0.1:0.2:0.01:0.001:0.1。

所述的種子液是枯草芽孢桿菌孢子懸浮液或酵母菌孢子懸浮液接種到種子培養基中培養得到。

所述的種子液中固形物的體積分數為20-30%。

所述的種子培養基中各組分及其濃度為：胰蛋白胨0.5-1%、葡萄糖2-3%、氯化鈉0.1-0.2%、硫酸銨0.1-0.35%、牛肉膏0.01-0.02%、瓊脂3-5%、市售油橄欖葉提取物0.01-0.02%，水余量，培養基pH值為7.0-7.5。

本發明用經少量油橄欖葉提取物誘導培養的枯草芽胞桿菌或酵母菌種子液對油橄欖葉進行發酵處理，利用生物轉化手段實現活性物質的有效提取，這種處理方法較之傳統提取方法的優點在于簡單高效，能耗低，提取效率高，最大程度的保存了活性成分，葉料在纖維素酶的輔助作用下可有效的實現細胞壁的破壞，提高活性成分的溶出率，制得的產品中有效成分含量更高，同時在微生物的作用下還能將一部分活性物質轉化為保健功能更為強大的代謝產物，更易被人體吸收利用，實現了油橄欖葉的高值化利用。

具體實施方式

一種發酵提取油橄欖葉生物活性物質的方法，包括以下步驟：

（1）挑選新鮮健康的油橄欖葉，清洗干凈后陰干至含水量≤10%，隨后進行粉碎處理，過50目篩，取100kg粉料滅菌處理后與碳源、氮源、麥芽汁、纖維素酶混勻后接種種子液，在30℃條件下發酵15天，其中粉料、碳源、氮源、麥芽汁、纖維素酶、種子液的重量比為1:0.1:0.2:0.01:0.001:0.1；

（2）發酵結束后過濾留清液備用；

（3）將步驟（2）得到的液體經真空濃縮處理，產物在60℃條件下干燥滅活，即得油橄欖葉生物活性提取物。

其中種子液是枯草芽孢桿菌孢子懸浮液或酵母菌孢子懸浮液接種到種子培養基中培養得到，其中固形物的體積分數為20%。

采用的種子培養基中各組分及其濃度為：胰蛋白胨0.5%、葡萄糖2%、氯化鈉0.1%、硫酸銨0.1%、牛肉膏0.01%、瓊脂3%、市售油橄欖葉提取物0.01%，水余量，培養基pH值為7.0。