[發明專利]一種制備（R）-2-氯-1-（3;4-二氟苯基）乙醇的方法在審
| 申請號： | 201710784540.7 | 申請日： | 2017-09-04 |
| 公開（公告）號： | CN109439696A | 公開（公告）日： | 2019-03-08 |
| 發明（設計）人： | 竺偉;包蕾;胡集鋮 | 申請（專利權）人： | 尚科生物醫藥（上海）有限公司 |
| 主分類號： | C12P7/22 | 分類號： | C12P7/22 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 二氟苯基 制備 乙醇 酮還原酶 基因工程技術 氨基酸序列 醫藥中間體 原子利用率 后處理 產物分離 催化作用 環境友好 酶法制備 工藝流程 手性醇 提純 底物 乙酮 催化 篩選 轉化 | ||
1.一種制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮在酮還原酶催化作用下，轉化為（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇，所述酮還原酶的氨基酸序列如（a）或（b）所述：
（a）、所述酮還原酶具有如表SEQ ID No.2 所記載的氨基酸序列；
（b）、所述酮還原酶為將表SEQ ID No.2 中的氨基酸序列經過一個或多個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加，且能催化2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮轉化為（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的酮還原酶。
2.如權利要求1所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：（b）所述的酮還原酶的氨基酸序列與（a）所述酮還原酶的氨基酸序列具備90%以上的同源性，且能催化2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮轉化為（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇。
3.如權利要求1所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：所述酮還原酶的基因序列如下（c）或（d）所示：
（c）、基因的核苷酸序列為序列表SEQ ID No.1所示基因序列；
（d）、與（c）具有90%以上的同源性，且能催化2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮轉化為（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的酮還原酶的基因序列。
4.如權利要求1所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮在酮還原酶催化作用下，轉化為（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇，步驟包括：將2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮、酮還原酶酶粉或含有酮還原酶的細胞、緩沖劑一起配置成水/異丙醇混合溶液，反應得到產物。
5.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：所述2-氯-1-( 3 ,4-二氟苯基)乙酮濃度為1～200g/L；酮還原酶酶粉濃度為2～10g/L或含有酮還原酶的細胞的濃度為10～50g/L。
6.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：所述水/異丙醇溶液中水與異丙醇體積比為1:0.3～0.5。
7.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：反應溫度為24～45℃。
8.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：反應時間為5～36h。
9.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：反應液中還添加有輔因子，所述輔因子選自NAD+、NADH、NADP+和NADPH 的任意一種或它們的組合物。
10.如權利要求4所述的制備（R）-2-氯-1-（3,4-二氟苯基）乙醇的方法，其特征在于：所述含有酮還原酶的細胞選自基因工程改造的酵母菌或大腸桿菌。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于尚科生物醫藥（上海）有限公司，未經尚科生物醫藥（上海）有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710784540.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
