[發明專利]一種麥芽糖轉化率提高的海藻糖合酶及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710776826.0
• 申請日: 2015-04-28
• 公開（公告）號: CN107384902B
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 吳敬;謝艷萍
• 申請（專利權）人: 湖南匯升生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/90
• 分類號: C12N9/90;C12N15/70;C12P19/12
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種海藻糖合酶突變體，其特征在于，相對于海藻糖合酶親本，將第295位的組氨酸突變成天冬酰胺；或將第295位的組氨酸突變成天冬酰胺，同時將第344位的甲硫氨酸突變成賴氨酸；或將第295位的組氨酸突變成天冬酰胺、第344位的甲硫氨酸突變成賴氨酸，同時將第367位的甲硫氨酸突變成亮氨酸；所述海藻糖合酶親本的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.制備權利要求1所述突變體的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)在親本海藻糖合酶氨基酸序列的基礎上確定突變位點；設計定點突變的突變引物，以攜帶海藻糖合酶基因的載體為模板進行定點突變并構建含突變體的質粒載體；

(2)將攜帶編碼突變體的基因的質粒轉化進宿主細胞；

(3)挑選陽性克隆進行發酵培養，并純化得到海藻糖合酶突變體。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述質粒載體為pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一種。

4.權利要求1所述突變體在制備海藻糖中的應用。

5.編碼權利要求1所述突變體的基因。

6.攜帶權利要求5所述基因的細胞。

7.權利要求6所述細胞在制備海藻糖中的應用。