[發(fā)明專利]一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法及應(yīng)用及藥物

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710775034.1
• 申請(qǐng)日: 2017-08-31
• 公開（公告）號(hào): CN107496459A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周菁;孫紅玉;肖貞良;田坤;陳章;連亨寧;胡繩;李志偉;馬李杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 周菁
• 主分類號(hào): A61K35/42
• 分類號(hào): A61K35/42;A61K9/06;A61P1/18;A61P11/00;A61L27/52;A61L27/36;A61L27/50
• 代理公司: 成都頂峰專利事務(wù)所(普通合伙)51224
• 代理人: 陳錢

1.一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：包括以下步驟：

將大鼠脫細(xì)胞肺組織粉碎，然后按照8mg/ml-12mg/ml比例加入鹽酸-胃蛋白酶溶液中，進(jìn)行溶解；

向溶解后的溶液中加入0.05M-0.15M氫氧化鈉和8×PBS-12×PBS調(diào)至生理狀態(tài)，然后置于30℃-40℃條件下直至形成膠狀的肺基質(zhì)水凝膠。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：所述大鼠脫細(xì)胞肺組織的制備方法如下：

1)將大鼠全麻后，向全身灌注肝素，取大鼠完整的心肺組織；

2)將套管針經(jīng)右心室插入肺動(dòng)脈并固定，設(shè)置蠕動(dòng)泵速度為4-6ml/分鐘，使用0.1％十二烷基硫酸鈉預(yù)充整個(gè)灌注管道；

3)依次采用0.1％十二烷基硫酸鈉灌注1.8-2.2h，采用去離子水灌注14-16分鐘，采用1％Triton X-100溶液灌注8-12分鐘，采用添加雙抗的PBS灌注70-74小時(shí)，直至心肺組織透明，并去除殘余的洗滌劑，得到大鼠脫細(xì)胞肺組織。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：將大鼠全麻后，采用腹主動(dòng)脈插管并使用50單位/毫升的肝素向全身灌注。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：蠕動(dòng)泵采用卡片式蠕動(dòng)泵，蠕動(dòng)泵以5ml/分鐘的速度將0.1％十二烷基硫酸鈉預(yù)充整個(gè)灌注管道。

5.根據(jù)權(quán)利要求2任一所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：

依次采用0.1％十二烷基硫酸鈉灌注2h，去離子水灌注15分鐘，1％Triton X-100溶液灌注10分鐘，添加雙抗的PBS灌注72小時(shí)，直至組織透明。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：

去除殘余的洗滌劑步驟為：采用Dnase溶液灌洗1次后，用生理鹽水漂洗3-5次。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：大鼠脫細(xì)胞肺組織粉碎步驟為：將大鼠脫細(xì)胞肺組織低溫凍干后，再用粉碎機(jī)磨成粉末。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種肺基質(zhì)水凝膠的制備方法，其特征是：大鼠脫細(xì)胞肺組織粉末按照10mg/ml比例加入鹽酸-胃蛋白酶溶液中，室溫緩慢攪拌至溶解狀態(tài)，通過加入0.1M氫氧化鈉和10×PBS調(diào)至Ph 7.4，并置于37℃直至形成膠狀的肺基質(zhì)水凝膠。

9.一種采用權(quán)利要求1至8任一所述制備方法制作的肺基質(zhì)水凝膠在治療重癥急性胰腺炎肺損傷藥物中的應(yīng)用。

10.一種治療重癥急性胰腺炎肺損傷藥物，其特征是：包括權(quán)利要求1至8任一所述肺基質(zhì)水凝膠的制備方法制作的肺基質(zhì)水凝膠。