[發明專利]多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法

在審

• 申請號: 201710771674.5
• 申請日: 2017-08-31
• 公開（公告）號: CN108008024A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 金怡平;袁金橋;張瑜
• 申請（專利權）人: 嘉實（湖南）醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法，所述檢測方法采用高效液相色譜法進行測定，具體檢測方法如下：色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵和硅膠，流動相為水和乙腈的混合溶劑梯度洗脫，柱溫為25～35℃，流動相流速為0.5～1.5mL/min，檢測波長為210～230nm；多索茶堿原料藥配制成5～15mg/mL的溶液；進樣量為30～60μL，記錄色譜圖。本發明提供的檢測方法可以有效的分離出多索茶堿原料藥中的基因毒性雜質峰，該方法極大的提高了基因毒性雜質的檢測靈敏度，可簡單、快速、穩定的檢測出多索茶堿原料藥基因毒性雜質。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法。

背景技術

多索茶堿是甲基黃嘌呤的衍生物。英文名稱Doxofylline，化學名稱1,3-二甲基-7-(1,3-二氧環戊基-2-基)甲基-3,7-二氫-1H-嘌呤-2,6-二酮，分子式為C11H14N4O4，分子量為266.25，化學結構式：

多索茶堿是甲基黃嘌呤的衍生物，它是一種支氣管擴張劑，可直接作用于支氣管，通過抑制平滑肌細胞內的磷酸二酯酶發揮松弛支氣管平滑肌、抑制哮喘的作用。多索茶堿松弛支氣管平滑肌痙攣的作用較氨茶堿強10-15倍，并具有茶堿所沒有的鎮咳作用。多索茶堿無腺苷受體阻斷作用，故與茶堿相比，較少引起中樞、胃腸道及心血管等肺外系統的不良反應，但大劑量給藥仍可引起血壓下降等。另外，體內外研究證實本藥還具有抑制血小板活化因子(PAF)誘導的支氣管收縮以及繼發的血栓素A2生成的作用。在大鼠體內研究中發現本藥可抑制PAF誘導的胸膜炎及滲出，還可抑制白三烯C4的生成。因此多索茶堿的有效性和安全性更高，臨床應用價值更大。

多索茶堿在合成過程中使用到對甲苯磺酸和乙二醇，有可能會反應生成對甲苯磺酸乙二酯和對甲苯磺酸二乙酯。該結構含有對甲苯磺酸酯，為潛在基因毒性雜質。根據該藥制劑的用法用量，上述基因毒性雜質限度在2ppm，一般液相方法分離度和靈敏度難以達到要求。目前尚未發現有關多索茶堿原料藥中基因毒性雜質檢測的文獻報道。

因此，亟需開發一種合理的色譜系統，制定出簡單、靈敏的多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法，以便控制多索茶堿原料藥的質量。

發明內容

為了解決現有技術中存在的缺少多索茶堿原料藥中基因毒性雜質檢測方法的問題，本發明提供了一種多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法，所述檢測方法采用高效液相色譜法進行測定，具體檢測方法如下：

(1)色譜條件

填充劑為十八烷基硅烷鍵和硅膠，

流動相為水和乙腈的混合溶劑，梯度洗脫，

柱溫為25～35℃，

流動相流速為0.5～1.5mL/min，

檢測波長為210～230nm；

(2)樣品配制

稱取多索茶堿原料藥，用水和乙腈的混合溶劑配制成含多索茶堿濃度為5～15mg/mL的溶液；

(3)檢測方法

精密量取供試品溶液30～60μL，注入高效液相色譜儀中，記錄色譜圖。

進一步地，本發明所述的多索茶堿原料藥中基因毒性雜質的檢測方法，步驟(1)色譜條件中流動相水和乙腈的體積比為70：30～75：25。