[發明專利]一種番茄幼胚培養方法及其培養基

有效

• 申請號: 201710765416.6
• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107372119B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 徐明磊;張旭偉;姚會敏;李紅艷;翟賽亞;張雯雯;王艷曉;王婷婷;徐迅;劉冠楠;孫亞楠
• 申請（專利權）人: 河南質量工程職業學院
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;A01H4/00
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

本發明屬于幼胚培養技術領域，公開了一種番茄幼胚培養方法及其培養基，包括消毒操作：采摘番茄幼果，先經自來水充分沖洗，再用10％次氯酸鈉表面滅菌15min，然后用無菌水沖洗3?5次完成消毒操作。無菌接種：在無菌條件下進行取出幼胚、無菌接種，每瓶接種10個幼胚，隨時觀察生根生芽情況。對結果進行統計和比較。培養幼胚：接種后在培養溫度25士1℃，每天光照12h，進行人工培養。幼苗轉瓶：番茄幼苗生長，進行轉瓶，使每瓶幼苗數在5株。煉苗：移栽前要打開瓶口，陰處放置1?3天進行煉苗，幼苗移栽：苗高到5?7cm時進行移栽，取出移栽到裝有營養土的營養缽中，澆足水，保持高濕度。5?7d后，再生植株即可正常生長發育。

技術領域

本發明屬于幼胚培養技術領域，尤其涉及一種番茄幼胚培養方法及其培養基。

背景技術

目前，番茄營養豐富，栽培面積大，在我國農業生產和作物育種中占有非常重要的地位。而番茄的常規采種操作較為復雜，需要在番茄果實完熟后取出種子并經過充分后熟等程序才能再次播種，致使傳統育種技術存在育種周期偏長、增產潛力有限等局限性。因而探索將育種周期短提高育種效率的技術手段用于番茄等重要作物的遺傳上便顯得十分必要和迫切。

綜上所述，現有技術存在的問題是：番茄的常規采種操作較為復雜，耗時較長，番茄生長周期達到120天左右，致使育種效率極為低下。目前一般采用南繁或溫室設施提高育種效率，但是番茄種子本身的特性決定其采摘后必須經歷后熟才能夠正常萌發，因而現有技術及手段不能從根本上縮短番茄生長周期、提高育種效率。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種番茄幼胚培養方法。

本發明是這樣實現的，一種番茄幼胚培養方法，包括:

步驟一，消毒操作：按照研究方案采摘目的番茄幼果，先經自來水充分沖洗，再用10％次氯酸鈉表面滅菌15min，然后用無菌水沖洗3-5次完成消毒操作。

步驟二，無菌接種：在無菌條件下進行取出幼胚、無菌接種到特定培養基上，每瓶接種10個幼胚，隨時觀察生根生芽情況。

步驟三，培養幼胚：接種后在培養溫度25士1℃，每天光照12h，光照強度2500LX下進行人工培養。

步驟四，幼苗轉瓶：番茄幼苗生長到一定程度，進行轉瓶，使每瓶幼苗數在5株，不擁擠即可。

步驟五，煉苗：移栽前要打開瓶口，陰處放置1-3天進行煉苗。

步驟六，幼苗移栽：苗高到5-7cm時進行移栽，取出幼苗移栽到裝有營養土的營養缽中，澆足水，保持較高濕度。5-7d后，再生植株即可正常生長發育。

進一步，所述培養基以MS為基本培養基附加1.0mg/L 6-BA、1.0mg/L GA3、0.2mg/LIAA的培養基組合。

進一步，所述胚齡為經優化試驗確定的番茄幼胚培養授粉后30天。

進一步，所述培養基培養基的配制方法為：

步驟1，培養基母液的配制和保存；

以上各種營養成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。

上述幾種母液都要單獨配成1L的貯備液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢后，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它們混溶，最后定容到1L。