[發明專利]一種氨基取代星孢菌素類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710765141.6
• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107556323B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 馬忠俊;周彪;丁婉婧
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D487/14
• 分類號: C07D487/14;A61P29/00;A61P35/00;A61P35/02;A61P31/18;A61P17/00;A61P19/02;C12P17/10;C12R1/465
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種氨基取代星孢菌素類化合物的制備方法，其特征在于，所述氨基取代星孢菌素類化合物，命名為12-N-甲基-k252c，結構式如式I：

所述制備方法包括以下步驟：

(1)發酵培養放線菌獲得發酵產物；

(2)發酵產物過濾去除菌絲體獲得粗提物；

(3)粗提物分離純化獲得所述氨基取代星孢菌素類化合物，

其中，所述放線菌為鏈霉菌(Streptomyces sp.)，保藏號為CICC No.172617，

發酵使用培養基為大米培養基，所述大米培養基按以下組分制成：大米∶25％的海鹽水＝1g∶1～2mL，

發酵培養方法為：將上述鏈霉菌接種于含有250mL液體培養基的500mL錐形瓶中，每瓶含250mL高氏一號液體培養基，在搖床中28℃下以180rpm振蕩培養4天，獲得種子液，

以每瓶接種8mL的量將上述種子液接種到大米培養基中，28℃靜置培養60天后終止發酵，

步驟(3)中分離純化的方法包括以下步驟：

(a)粗提物用乙酸乙酯萃取；

(b)萃取液濃縮后，使用凝膠柱層析純化，并用甲醇-水體系洗脫；

(c)將包含目的化合物的洗脫產物合并后，使用反相高效液相色譜分離獲得所述氨基取代星孢菌素類化合物，

步驟(a)中萃取方法為：用與粗提物等體積的乙酸乙酯萃取3次，

步驟(b)中洗脫方法為使用甲醇體積比為20％～100％的甲醇-水體系梯度洗脫，

步驟(c)中反相高效液相色譜分離使用的填料為十八烷基鍵合硅膠，流動相為40％-60％乙腈/水體系以10mL/min梯度洗脫，洗脫時間60min，收集包含目的化合物的洗脫產物。