[發(fā)明專利]林可霉素的檢測凝膠柱及林可霉素的檢測方法

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• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107389958A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設計）人: 蔣文曉;陳獻雄;柯躍斌;翟鵬;呂子全
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: G01N33/94
• 分類號: G01N33/94;G01N33/577
• 代理公司: 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司44224
• 代理人: 徐春祺

1.一種林可霉素的檢測凝膠柱，其特征在于，包括空心柱以及設置在所述空心柱內(nèi)的檢測層和質控層，所述空心柱上設有進口和出口，所述檢測層靠近所述進口，所述質控層靠近所述出口；

所述檢測層包括凝膠載體、偶聯(lián)在所述凝膠載體上的第一多克隆二抗以及結合在所述第一多克隆二抗上的林可霉素單克隆抗體，其中所述第一多克隆二抗為所述林可霉素單克隆抗體的抗體；

所述質控層包括凝膠載體、偶聯(lián)在所述凝膠載體上的第二多克隆二抗以及結合在所述第二多克隆二抗上的抗化學發(fā)光標記物抗體，其中所述第二多克隆二抗為所述抗化學發(fā)光標記物抗體的抗體。

2.根據(jù)權利要求1所述的林可霉素的檢測凝膠柱，其特征在于，所述第一多克隆二抗為羊抗鼠二抗，所述林可霉素單克隆抗體為鼠源的林可霉素單克隆抗體。

3.根據(jù)權利要求1所述的林可霉素的檢測凝膠柱，其特征在于，所述第二多克隆二抗為羊抗兔二抗，所述抗化學發(fā)光標記物抗體為兔源的抗HRP多克隆抗體。

4.根據(jù)權利要求1所述的林可霉素的檢測凝膠柱，其特征在于，所述檢測層和所述質控層之間具有間隙。

5.根據(jù)權利要求1所述的林可霉素的檢測凝膠柱，其特征在于，所述凝膠載體為經(jīng)溴化氰活化的瓊脂糖凝膠。

6.一種林可霉素的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

將待測樣品加入如權利要求1～5任一項所述的檢測凝膠柱中；

向所述檢測凝膠柱中加入化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原，以使所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原與所述待測樣品競爭性結合所述檢測層中的所述林可霉素單克隆抗體；

向所述檢測凝膠柱中加入顯色液，其中，所述顯色液能夠與化學發(fā)光標記物反應產(chǎn)生顏色變化；及

根據(jù)所述檢測層的顏色和所述質控層的顏色判斷所述待測樣品中是否含有林可霉素。

7.根據(jù)權利要求6所述的林可霉素的檢測方法，其特征在于，還包括：

將所述檢測層的顏色與由林可霉素標準品建立的標準進行比較，獲得所述待測樣品中所述林可霉素的含量。

8.根據(jù)權利要求6所述的林可霉素的檢測方法，其特征在于，所述向所述檢測凝膠柱中加入化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原的步驟中，所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原的濃度為400ng/mL～600ng/mL，所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原的加入量為所述檢測層的體積的1倍～3倍。

9.根據(jù)權利要求6所述的林可霉素的檢測方法，其特征在于，所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原通過如下方法制備得到：

將林可霉素溶解在N，N-二甲基甲酰胺中，然后加入NaIO₄，反應后得到A液；

將化學發(fā)光標記物溶解在NaHCO₃溶液得到B液；

將所述B液滴加到所述A液中，得到中間產(chǎn)物；及

用NaBH₄還原所述中間產(chǎn)物，得到所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原。

10.根據(jù)權利要求6所述的林可霉素的檢測方法，其特征在于，所述化學發(fā)光標記物標記的林可霉素酶標抗原為HRP標記的林可霉素酶標抗原，所述顯色液為TMB顯色液。