[發明專利]一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法

在審

• 申請號: 201710758407.4
• 申請日: 2017-08-29
• 公開（公告）號: CN107632146A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: 張宏宇;顧志明;錢偉
• 申請（專利權）人: 蘇州榭睿迦醫療科技發展有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 上海恒銳佳知識產權代理事務所(普通合伙)31286
• 代理人: 章月溱

1.一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法，其特征在于包括如下步驟：

a)對包載bFGF的水凝膠進行冷凍干燥，表面噴金處理；對包載bFGF的水凝膠浸泡于PBS緩沖溶液中；

b)使用ELISA試劑盒檢測上述包載bFGF的SBMA水凝膠上清中bFGF的含量；

c)通過ELISA蛋白溶液與稀釋劑配置多個ELISA蛋白標準品；

d)取反應板，在反應板中孔內加入ELISA蛋白標準品和包載bFGF的水凝膠溶液，重復混合；

e)反應板每個孔加入蒸餾水和第一抗體工作液，重復混合；

f)加入酶標抗體工作液，重復混合；

g)加入顯色底物工作液，重復混合；

h)加入終止液以終止反應；

i)用酶標儀進行吸光度檢測出bFGF的含量；

通過步驟b)與步驟i)中含量共同確認bFGF的累積釋放量。

2.如權利要求書1中一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法，其特征在于：步驟a)中，稱取包載bFGF的水凝膠，并浸泡于PBS緩沖溶液里，靜置，取定量的上清液，同時再補充等量的PBS，于低溫保存。

3.如權利要求書1中一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法，其特征在于：步驟c)中，取多個離心管，第一離心管加入ELISA蛋白稀釋液，第二至第八離心管均加入少于第一離心管量的ELISA蛋白稀釋液，在第一離心管中加入ELISA蛋白溶液，混勻，吸出一定量加入至第二離心管中，震蕩混勻后，再從第二離心管吸出等量的溶液，加入至第三離心管中。如此反復對半稀釋，最后從最后一個離心管中吸出等量溶液棄去，形成ELISA蛋白標準品。

4.如權利要求書1中一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法，其特征在于：bFGF的累積釋放量＝ELISA試劑盒檢測的檢測量+酶標儀檢測的吸光度檢測量。

5.如權利要求書1中一種包載bFGF的水凝膠釋放率的檢測方法，其特征在于：在e)步驟中，置于37℃孵育40分鐘，用洗滌液將反應板充分洗滌，在濾紙上印干。