[發(fā)明專利]一種將miRNA從石墨烯上解吸附的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710756474.2
• 申請日: 2017-08-29
• 公開（公告）號: CN107447011B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 閆赫;邢婉麗
• 申請（專利權(quán)）人: 博奧生物集團(tuán)有限公司;清華大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 劉猛;趙青朵

1.一種將miRNA從石墨烯上解吸附的方法，其特征在于，將吸附有miRNA的還原氧化石墨烯直接進(jìn)行原位反轉(zhuǎn)錄，將miRNA解吸附下來；所述原位反轉(zhuǎn)錄的體系為：

8-16μL原位反轉(zhuǎn)錄buffer、1-5μL反轉(zhuǎn)錄酶、余量水，共20μL；

其中，所述反轉(zhuǎn)錄酶為兩種酶組分，一種為E.coli Poly(A)polymerase,另一種為RTase。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述原位反轉(zhuǎn)錄的體系為：

10μL原位反轉(zhuǎn)錄buffer、2μL反轉(zhuǎn)錄酶、8μL水，共20μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任意一項(xiàng)所述方法，其特征在于，所述原位反轉(zhuǎn)錄在42℃下進(jìn)行1小時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述還原氧化石墨烯為磁性還原氧化石墨烯。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，所述磁性還原氧化石墨烯通過將還原氧化石墨烯修飾到磁珠上獲得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述miRNA為miRNA let-7a。

7.原位反轉(zhuǎn)錄在將miRNA從還原氧化石墨烯上解吸附中的應(yīng)用；所述原位反轉(zhuǎn)錄的體系為：

8-16μL原位反轉(zhuǎn)錄buffer、1-5μL反轉(zhuǎn)錄酶、余量水，共20μL；

其中，所述反轉(zhuǎn)錄酶為兩種酶組分，一種為E.coli Poly(A)polymerase,另一種為RTase。