[發(fā)明專利]大腸癌相關(guān)的miRNA作為生物標(biāo)志物的應(yīng)用及大腸癌檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710743893.2
• 申請日: 2017-08-25
• 公開（公告）號: CN107326092B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李炯;何簫夢;劉林泉;丁浩
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市恩普電子技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 生啟

1.與生物標(biāo)志物特異性結(jié)合的檢測物在制備大腸癌檢測試劑或大腸癌檢測試劑盒中的應(yīng)用；

所述生物標(biāo)志物包括hsa-miR-92a-1-5p、hsa-miR-125b-5p和hsa-miR-218-5p；

所述生物標(biāo)志物來源自人血漿；

所述與生物標(biāo)志物特異性結(jié)合的檢測物包括：

堿基序列如SEQ ID No.1所示的第一正向引物、堿基序列如SEQ ID No.2所示的第二正向引物、堿基序列如SEQ ID No.3所示的第三正向引物，以及堿基序列如SEQ ID No.4所示的通用反向擴(kuò)增引物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑盒還包括RNA提取試劑、加A尾試劑和RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑；

所述RNA提取試劑用于提取待測樣品中的RNA；

所述加A尾試劑用于在提取的所述RNA的一端加A堿基；

所述RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑用于將加A尾后的所述RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑包括RNA逆轉(zhuǎn)錄引物，所述RNA逆轉(zhuǎn)錄引物為通用RNA逆轉(zhuǎn)錄引物，所述通用RNA逆轉(zhuǎn)錄引物的堿基序列如SEQ IDNo.5所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑盒還包括能夠檢測內(nèi)參基因的試劑，所述內(nèi)參基因選自U6、GAPDH及β-actin中的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述能夠檢測內(nèi)參基因的試劑包括內(nèi)參基因RNA逆轉(zhuǎn)錄引物、內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增正向引物和內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增反向引物，其中，所述內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增正向引物針對所述內(nèi)參基因逆轉(zhuǎn)錄后得到的cDNA設(shè)計。

6.一種大腸癌檢測試劑盒，其特征在于，包括堿基序列如SEQ ID No.1所示的第一正向引物、堿基序列如SEQ ID No.2所示的第二正向引物、堿基序列如SEQ ID No.3所示的第三正向引物，以及堿基序列如SEQ ID No.4所示的通用反向擴(kuò)增引物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的大腸癌檢測試劑盒，其特征在于，還包括RNA提取試劑、加A尾試劑和RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑；

所述RNA提取試劑用于提取待測樣品中的RNA；

所述加A尾試劑用于在提取的所述RNA的一端加A堿基；

所述RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑用于將加A尾后的所述RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的大腸癌檢測試劑盒，其特征在于，所述RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑包括RNA逆轉(zhuǎn)錄引物，所述RNA逆轉(zhuǎn)錄引物為通用RNA逆轉(zhuǎn)錄引物，所述通用RNA逆轉(zhuǎn)錄引物的堿基序列如SEQ ID No.5所示。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大腸癌檢測試劑盒，其特征在于，還包括能夠檢測內(nèi)參基因的試劑，所述內(nèi)參基因選自U6、GAPDH及β-actin中的至少一種。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的大腸癌檢測試劑盒，其特征在于，所述能夠檢測內(nèi)參基因的試劑包括內(nèi)參基因RNA逆轉(zhuǎn)錄引物、內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增正向引物和內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增反向引物，其中，所述內(nèi)參基因PCR擴(kuò)增正向引物針對所述內(nèi)參基因逆轉(zhuǎn)錄后得到的cDNA設(shè)計。