[發(fā)明專(zhuān)利]一種P2Y12受體血小板凝集檢測(cè)試劑卡及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710738892.9
• 申請(qǐng)日: 2017-08-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107607728A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郎天丹;李陽(yáng);魏明明;邱笑違;董颯英
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京樂(lè)普醫(yī)療科技有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/86
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/86
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種P2Y12受體血小板凝集檢測(cè)試劑卡，其特征在于：該檢測(cè)試劑卡由四個(gè)檢測(cè)通道組成，一通道中含有由BSA和纖維蛋白原包被的凍干試劑，無(wú)激活劑，二通道中含有由BSA和纖維蛋白原包被的凍干試劑，含血小板最大激活劑iso-TRAP(凝血酶受體激活肽)，三通道中不含凍干試劑，四通道中含有由BSA和纖維蛋白原包被的凍干試劑，含血小板P2Y12受體激活劑ADP(二磷酸腺苷)和P2Y1受體拮抗劑PGE1(前列腺素E1)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的P2Y12受體血小板凝集檢測(cè)試劑卡的制備方法，其特征在于：所述凍干試劑包含聚苯乙烯或聚苯二乙微球。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微球，其特征在于，所述微球粒徑為4-6μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的微球，其特征在于，所述微球功能基團(tuán)為羧基基團(tuán)，GP IIb/IIIa受體配體的氨基基團(tuán)與微球羧基基團(tuán)通過(guò)酰胺鍵牢固結(jié)合，均勻分布在微球表面。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的凍干試劑，其特征在于，所述凍干試劑中包含近紅外染料，當(dāng)含有血小板的血液樣品和所述凍干試劑接觸時(shí)形成測(cè)定混合物，用近紅外光譜中的光照射所述測(cè)定混合物，并評(píng)估近紅外線在所述測(cè)定混合物中的透光率來(lái)評(píng)估由血小板介導(dǎo)的凝集。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的GP IIb/IIIa受體配體，其特征在于：所述GP IIb/IIIa受體配體可選自兔纖維蛋白原、牛纖維蛋白原或人纖維蛋白原任意一種或組合使用。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑卡，其特征在于：所述試劑卡二通道含血小板最大激活劑iso-TRAP的最終濃度為2-25μM；

優(yōu)選地，當(dāng)待測(cè)血液樣品加入到試劑卡中后，所述血小板最大激活劑iso-TRAP的最終濃度為6-16μM。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑卡，其特征在于：所述試劑卡四通道P2Y12受體激活劑ADP的最終濃度為5-40μM，以及所述P2Y1受體拮抗劑PGE1的最終濃度為5-40nM；

優(yōu)選地，當(dāng)待測(cè)血液樣品加入到試劑卡中后，所述P2Y12受體激活劑ADP的最終濃度為15-25μM；

優(yōu)選地，當(dāng)待測(cè)血液樣品加入到試劑卡中后，所述P2Y1受體拮抗劑PGE1的最終濃度為15-25nM。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述血液樣品，其特征在于：所述試劑卡的檢測(cè)血液樣品為全血樣品。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干試劑，其特征在于，所述凍干試劑中添加的凍干保護(hù)劑成分如下：

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述凍干保護(hù)劑，其特征在于，所述凍干保護(hù)劑成分如下：

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑卡，其特征在于：所述試劑卡包含樣本倉(cāng)、暫存?zhèn)}、微流通道和檢測(cè)通道，樣本倉(cāng)與暫存?zhèn)}連通，暫存?zhèn)}與微流通道連通，微流通道與所述四個(gè)檢測(cè)通道連通。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑卡進(jìn)行檢測(cè)的方法，其特征在于，所述檢測(cè)方法為：

使待測(cè)全血樣品通過(guò)樣本倉(cāng)進(jìn)入到試劑卡中，全血樣品沿著微流通道最終流入四個(gè)檢測(cè)通道，檢測(cè)通道三不含凍干試劑，作為空白對(duì)照，檢測(cè)通道一、二和四中的凍干試劑溶解于樣品中，若其與樣品中的血小板發(fā)生反應(yīng)則會(huì)導(dǎo)致透光率增加，通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)前后光學(xué)信號(hào)的變化來(lái)完成對(duì)樣品的檢測(cè)。

14.根據(jù)權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)所述的試劑卡應(yīng)在本公司配套儀器全自動(dòng)血小板聚集儀中應(yīng)用。