[發明專利]一種陰道炎多聯檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201710728491.5
• 申請日: 2017-08-23
• 公開（公告）號: CN107389940A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 楊致亭;王鴻鑫;劉根賢;房克爽;楊明霞
• 申請（專利權）人: 濰坊市康華生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 濰坊正信致遠知識產權代理有限公司37255
• 代理人: 王偉霞

技術領域

本發明涉及體外診斷技術領域，具體涉及一種陰道炎多聯檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

陰道感染是臨床最常見的婦科感染性疾病，而陰道炎為陰道感染的典型臨床癥候群之一，且發病率居高不下，通常陰道炎的臨床表現和征兆比較相似，如異常陰道分泌物，異味、瘙癢、疼痛以及其他的一些不適。其中，細菌性陰道炎、白色念珠菌性陰道炎及滴蟲性陰道炎均為常見陰道感染。

細菌性陰道炎主要是由于陰道正常菌群的生態平衡發生紊亂，優勢菌乳酸桿菌減少或消失，陰道加德納菌、厭氧菌等微生物過度生長而引起的一種常見疾病；白色念珠菌為條件致病菌，在維持陰道菌群的生態平衡及陰道自凈過程中起了一定的作用。只有在一定條件下，當陰道內環境發生變化，適宜該菌生長時，白色念珠菌可迅速繁殖引起白色念珠菌性陰道炎；陰道毛滴蟲是一種常見于性傳遞的厭氧性寄生物，當滴蟲侵入陰道后，消耗陰道上皮細胞的糖原，阻礙乳糖形成，使陰道pH值在5.0～6.6之間，此時極易合并細菌感染，使分泌物呈膿性。

國內實驗室檢測陰道炎的主要方法包括:(1)顯微鏡鏡檢:簡便，但靈敏度低；(2)分離培養:準確度高，但操作復雜，時間過長；(3)免疫學檢測:如免疫熒光試驗、酶聯免疫法；(4)核酸檢測法:成本過高。目前，顯微鏡鏡檢為臨床常用的方法，必要時可做培養和菌種鑒定。免疫熒光試驗、酶免疫試驗及核酸檢測法因需相應儀器設備及操作人員的技術要求而很少使用。此外陰道分泌物成分復雜多樣，分泌物中的干擾物質會影響檢測，因此針對現有技術存在的問題，提供一種用于檢測陰道炎的多聯檢測試劑盒，同時還建立了該檢測試劑盒的制備方法。

發明內容

本發明的目的是：提供一種能同時檢測陰道加德納菌、白色念珠菌和陰道毛滴蟲的陰道炎多聯檢測試劑盒，該試劑盒檢測時可分解、過濾陰道分泌物中的干擾物質，大大提高了試劑盒的靈敏度。

為了實現上述發明的目的，本發明的技術方案是：

一種陰道炎多聯檢測試劑盒，包括盒體，所述盒體內設有檢測卡和樣本處理液瓶；所述檢測卡包括卡蓋和卡體，所述卡體內設有陰道加德納菌檢測試紙條、白色念珠菌檢測試紙條和陰道毛滴蟲檢測試紙條，所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條均設有第一樣品墊層和經過樣品墊預處理液處理的第二樣品墊層。

作為一種優選的技術方案，所述樣本處理液瓶內的處理溶液為牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸、疊氮鈉和15-25mM的磷酸鹽緩沖液配制而成的pH7.2-7.5處理溶液，且每100mL處理溶液中包含0.5～1％w/v的牛血清白蛋白10～15mL、1.0～2.0％w/v的乙二胺四乙酸3～5mL和0.03～0.05％w/v的疊氮鈉1～3mL。

作為一種優選的技術方案，所述樣品墊預處理液為聚乙烯吡咯烷酮、酪蛋白、海藻糖、曲拉通X-100和15-25mM的Tris緩沖液配制的pH8-8.2的預處理液，且每1000mL預處理液中包含10～20g的聚乙烯吡咯烷酮、0.5～1％w/v的酪蛋白40～50mL、5～8％w/v的海藻糖10～15mL和0.3～0.5％w/v的曲拉通X-1001～2mL。

作為一種改進的技術方案，所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條的膠體金層分別涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲單克隆抗體層。

作為一種改進的技術方案，所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條的硝酸纖維素膜上均設有檢測線和質控線，相應檢測試紙條的硝酸纖維素膜上的檢測線分別為涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲單克隆抗體的檢測線，相應檢測試紙條的硝酸纖維素膜上的質控線為分別涂布有羊抗鼠IgG抗體層的質控線。

作為一種改進的技術方案，所述卡體的內部設有陰道加德納菌檢測試紙條限位板、白色念珠菌檢測試紙條限位板和陰道毛滴蟲檢測試紙條限位板，所述限位板上設有試紙條放置標識，所述限位板的兩端分別設有固定擋板，所述固定擋板分別位于所述限位板兩側。

作為一種改進的技術方案，所述卡蓋與所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條相對應的區域分別設有樣本加樣孔、觀測孔和安裝標識孔。

本發明的另一個目的是：提供一種陰道炎多聯檢測試劑盒的制備方法。

為了實現上述發明的目的，本發明的技術方案是：

一種陰道炎多聯檢測試劑盒的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：