[發(fā)明專(zhuān)利]一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710728491.5
• 申請(qǐng)日: 2017-08-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107389940A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊致亭;王鴻鑫;劉根賢;房克爽;楊明霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 濰坊市康華生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/577
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 濰坊正信致遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司37255
• 代理人: 王偉霞

1.一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，包括盒體，所述盒體內(nèi)設(shè)有檢測(cè)卡和樣本處理液瓶；所述檢測(cè)卡包括卡蓋和卡體，其特征在于：所述卡體內(nèi)設(shè)有陰道加德納菌檢測(cè)試紙條、白色念珠菌檢測(cè)試紙條和陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條，所述陰道加德納菌檢測(cè)試紙條、所述白色念珠菌檢測(cè)試紙條及所述陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條均設(shè)有第一樣品墊層和經(jīng)過(guò)樣品墊預(yù)處理液處理的第二樣品墊層。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述樣本處理液瓶?jī)?nèi)的處理溶液為牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸、疊氮鈉和15-25mM的磷酸鹽緩沖液配制而成的pH7.2-7.5處理溶液，且每100mL處理溶液中包含0.5～1％w/v的牛血清白蛋白10～15mL、1.0～2.0％w/v的乙二胺四乙酸3～5mL和0.03～0.05％w/v的疊氮鈉1～3mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述樣品墊預(yù)處理液為聚乙烯吡咯烷酮、酪蛋白、海藻糖、曲拉通X-100和15-25mM的Tris緩沖液配制的pH8-8.2的預(yù)處理液，且每1000mL預(yù)處理液中包含10～20g的聚乙烯吡咯烷酮、0.5～1％w/v的酪蛋白40～50mL、5～8％w/v的海藻糖10～15mL和0.3～0.5％w/v的曲拉通X-1001～2mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述陰道加德納菌檢測(cè)試紙條、所述白色念珠菌檢測(cè)試紙條及所述陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條的膠體金層分別涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體層。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述陰道加德納菌檢測(cè)試紙條、所述白色念珠菌檢測(cè)試紙條及所述陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條的硝酸纖維素膜上均設(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線，相應(yīng)檢測(cè)試紙條的硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線分別為涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體的檢測(cè)線，相應(yīng)檢測(cè)試紙條的硝酸纖維素膜上的質(zhì)控線為分別涂布有羊抗鼠IgG抗體層的質(zhì)控線。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述卡體的內(nèi)部設(shè)有陰道加德納菌檢測(cè)試紙條限位板、白色念珠菌檢測(cè)試紙條限位板和陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條限位板，所述限位板上設(shè)有試紙條放置標(biāo)識(shí)，所述限位板的兩端分別設(shè)有固定擋板，所述固定擋板分別位于所述限位板兩側(cè)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述卡蓋與所述陰道加德納菌檢測(cè)試紙條、所述白色念珠菌檢測(cè)試紙條及所述陰道毛滴蟲(chóng)檢測(cè)試紙條相對(duì)應(yīng)的區(qū)域分別設(shè)有樣本加樣孔、觀測(cè)孔和安裝標(biāo)識(shí)孔。

8.一種陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于所述制備方法包括以下步驟：

(1)樣本處理液的配制

將0.5～1％w/v的牛血清白蛋白10～15mL、1.0～2.0％w/v的乙二胺四乙酸3～5mL和0.03～0.05％w/v的疊氮鈉1～3mL，用15-25mM磷酸鹽緩沖液定容至100mL，調(diào)pH值為7.2～7.5，分別裝入試劑瓶?jī)?nèi)，得到樣品處理液；

(2)樣品墊預(yù)處理液的配制

將10～20g的聚乙烯吡咯烷酮，0.5～1％w/v的酪蛋白40～50mL，5～8％w/v的海藻糖10～15mL和0.3～0.5％w/v的曲拉通X-1001～2mL用15-25mMTris定容至1L，調(diào)pH值為8.0～8.2；

(3)樣品墊預(yù)處理

將裁切好的玻璃纖維浸泡于所述步驟(2)的樣品墊預(yù)處理液中，靜置5～8分鐘取出，經(jīng)過(guò)干燥處理后封存?zhèn)溆茫?!-- SIPO -->

(4)膠體金墊的制備

4.1抗陰道加德納菌單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金，調(diào)節(jié)pH至8.0～8.5，加入抗陰道加德納菌單克隆抗體，攪拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，離心復(fù)溶后固相于玻璃纖維，干燥備用；

4.2抗白色念珠菌單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金，調(diào)節(jié)pH至8.0～8.5，加入抗白色念珠菌單克隆抗體，攪拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，離心復(fù)溶后固相于玻璃纖維，干燥備用；

4.3抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金，調(diào)節(jié)pH至8.0～8.5，加入抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體，攪拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，離心復(fù)溶后固相于玻璃纖維，干燥備用；

(5)包被硝酸纖維素膜

5.1分別包被抗陰道加德納菌單克隆抗體、抗白色念珠菌單克隆抗體和抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體

用pH8.0～8.2的PBS緩沖液分別將抗陰道加德納菌單克隆抗體稀釋至0.2～0.3mg/mL，抗白色念珠菌單克隆抗體稀釋至0.4～0.5mg/mL，抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體稀釋至0.3～0.4mg/mL，并分別噴于相應(yīng)的硝酸纖維素膜上，形成抗陰道加德納菌單克隆抗體檢測(cè)線、抗白色念珠菌單克隆抗體檢測(cè)線和抗陰道毛滴蟲(chóng)單克隆抗體檢測(cè)線；

5.4包被羊抗鼠IgG抗體

用pH8.0～8.2的PBS緩沖液將羊抗鼠IgG抗體稀釋至1.4～1.6mg/mL，分別噴于所述步驟5.1相應(yīng)的硝酸纖維素膜上，形成羊抗鼠IgG抗體質(zhì)控線；

5.5將上述步驟5.4制得的硝酸纖維素膜置37℃烘箱中干燥1.5～2小時(shí)；

(6)檢測(cè)卡安裝好，將所述步驟(1)中樣本處理液和安裝好的檢測(cè)卡分別置于盒體內(nèi)，得到陰道炎多聯(lián)檢測(cè)試劑盒。