[發明專利]一種豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201710726649.5
• 申請日: 2017-08-22
• 公開（公告）號: CN107589117A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 周思旋;徐健;徐洪忠;肖芳萍;黃波;潘紅
• 申請（專利權）人: 貴州省畜牧獸醫研究所
• 主分類號: G01N21/84
• 分類號: G01N21/84;G01N1/28;G01N1/31
• 代理公司: 貴陽派騰陽光知識產權代理事務所(普通合伙)52110
• 代理人: 田江飛

1.一種豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒，其特征在于：由檢測試劑、器皿器械組成，所述的試劑由瑞氏染料、姬姆薩染料、甘油、吐溫-20、甲醇組成，所述的器皿器械由試劑瓶、膠頭滴管組成。

2.根據權利要求1所述的豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒，其特征在于：所述的試劑純度均要求為優級純。

3.一種豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

1、快速鏡試劑盒器皿器械的洗滌：

1.1將所需玻璃器皿放入裝有強酸氧化清洗劑的玻璃器皿缸中浸泡過夜；

1.2取出經強酸氧化清洗劑浸泡過夜的玻璃器，用熱肥皂液進行清洗，反復用自來水沖洗5次，用蒸餾水浸泡1小時取出玻璃器皿自然濾干。

1.3將玻璃器皿放入干燥消毒箱138℃干熱消毒1小時，冷卻后取出放入35℃恒溫干燥箱備用。

1.4滴管頭、塑料試劑瓶瓶的洗滌：將滴管頭和塑料瓶放入清水中浸泡30分鐘；將清水中浸泡過的滴管頭和塑料瓶用熱肥皂液進行清洗，反復用自來水沖洗5次，用蒸餾水浸泡1小時，取出滴管頭和塑料瓶自然濾干。

1.5將滴管頭和塑料瓶放入高壓消毒鍋15磅消毒30分鐘，冷卻后取出放入35℃恒溫干燥箱干燥備用。

2、快速鏡試劑盒試劑的配制：

2.1瑞氏染料和姬姆薩染料稱量前事先放入30-40℃溫箱干燥箱過夜；

2.2分別稱取：瑞氏染料粉1-1.8g、姬姆薩染料1-1.8g。

2.3分別量取：甘油20-36ml、吐溫-20 4-8ml、甲醇1000ml。

2.4將稱取的瑞氏染料和姬姆薩染料放置乳缽內，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至細粉末；

2.5在乳缽內加入甘油溶解染料，使染料在乳缽內顯現鏡面光澤，而無染料粉粒附著，加適量甲醇進行研磨，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔的2000ml容量瓶中；

2.6再加入甲醇研磨，重復數次，直至乳缽內無染料為止；

2.7在容量瓶中加入吐溫-20，用甲醇定容于2000ml；搖勻并密封瓶口，存室溫暗處24小時后過濾一次，2周后再過濾一次，即可使用；染色液儲存愈久，則染料溶解、分解越充分，此過程為染色液的熟化過程，儲存3個月以上染色效果更佳，注意密封避光保存，長期有效。

3、試劑盒包裝加工工藝：

包裝盒規格為120mm×70mm×70mm，盒內可存放兩個20mL試劑瓶及兩只膠頭滴管，對試劑盒的瓶簽、說明書、封口簽進行檢驗；

4、試劑盒的分裝：

4.1取甲醇15ml裝入經消毒干燥后的白色試劑瓶，瓶簽標記為I液；

4.2取熟化后的染液15ml裝入經消毒干燥后的棕色試劑瓶，瓶簽標記為II液；

4.3在盒內放入I液、II液，并放入兩只膠頭滴管和試劑盒使用說明書，包裝封口，即為豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒。

4.根據權利3所述的豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：所述步驟2.1是將瑞氏染料和姬姆薩染料稱量前事先放入35℃溫箱干燥箱過夜。

5.根據權利3所述的豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：所述步驟2.2分別稱取：瑞氏染料粉1.4g、姬姆薩染料1.4g。

6.根據權利3所述的豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：上述所述步驟2.3分別量取：甘油28ml、吐溫-20 6ml、甲醇1000ml。

7.根據權利3所述的豬附紅細胞體病快速鏡檢診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：所述的強酸氧化清洗劑洗液的配制為：稱取300g重鉻酸鉀，置于2500mL蒸餾水中，加熱溶解，冷卻，徐徐加入濃硫酸1700mL，邊加邊攪拌，待冷后裝瓶備用。