[發(fā)明專利]一種小葉楊與胡楊雜交種再生苗的培育方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710721972.3
• 申請(qǐng)日: 2017-08-22
• 公開（公告）號(hào): CN107810850B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王方琳;尉秋實(shí);柴成武;王飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅省治沙研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 王新生

本發(fā)明公開了一種小葉楊與胡楊雜交種再生苗的培育方法，包括以下步驟，建立外植體滅菌及無菌體系、不定芽誘導(dǎo)與增殖、生根培養(yǎng)和煉苗移栽；本發(fā)明采用組織培養(yǎng)的方法，在較短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)了小與胡楊優(yōu)質(zhì)試管苗的快速繁殖，整個(gè)繁殖過程從叢生芽誘導(dǎo)與增殖到試管苗生根僅需60天左右，大大提高了小與胡楊的成苗速度，對(duì)其植株的規(guī)模化、工廠化生產(chǎn)、擴(kuò)繁具有重要作用，可為我國西北干旱荒漠區(qū)鹽漬化土地改良及荒漠區(qū)植樹造林源源不斷地提供優(yōu)質(zhì)苗木。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于植物再生苗培育技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種小葉楊與胡楊雜交種再生苗的培育方法。

背景技術(shù)：

我國西北有大面積荒漠化及鹽漬化土地分布，這些土地的改良及利用是我國生態(tài)環(huán)境建設(shè)及林業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要任務(wù)，而造林樹種的貧乏是進(jìn)行荒漠鹽漬化土地改良面臨的主要困難之一，為迅速有效地解決這一問題，除進(jìn)行耐鹽樹種引種馴化外，還必須同時(shí)大力開展耐鹽、耐旱品種的選育。

小與胡楊(Populus simonii×P.euphratica)是我國學(xué)者董天慈于1980年成功培育的一種耐干旱、鹽堿而又能在較廣泛生態(tài)條件下生長(zhǎng)的楊樹雜交新品種，它是以小葉楊(Populussimonii Carr.)為母本(♀)、胡楊(P.euphratica Oliv.)為父本(♂)進(jìn)行多次、反復(fù)雜交試驗(yàn)后獲得的完全具有雙親融合性狀的優(yōu)良品種。總體來說，小與胡楊兼有小葉楊和胡楊兩者的優(yōu)點(diǎn)，即比小葉楊更耐鹽堿，比胡楊更抗干旱、而且生長(zhǎng)迅速，因此成為干旱地區(qū)鹽漬化土地改良及植樹造林中很有前途的樹種。

目前，國外有關(guān)小與胡楊的研究報(bào)道還是空白，國內(nèi)學(xué)者主要在雜交育種技術(shù)、硬枝扦插繁殖及引種馴化、幼苗的抗旱性等方面開展了一些研究，而有關(guān)其組織培養(yǎng)快速繁殖方面至今未見報(bào)道。

組織培養(yǎng)是在植物生理學(xué)以及細(xì)胞學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的無性繁殖方法。因其具有能使植物種植擺脫周期長(zhǎng)，可集中控制，規(guī)模化、自動(dòng)化生產(chǎn)，不受外界自然條件的影響，所繁殖的苗木可以很好地保持母株的優(yōu)良性狀等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于分子生物技術(shù)、苗木快速繁殖、脫毒苗生產(chǎn)、育種、次生代謝物生產(chǎn)及種質(zhì)資源保存等各種領(lǐng)域，并產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益。因此，利用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)，在不改變其母株優(yōu)良性狀的前提下，開展小與胡楊的組織培養(yǎng)，可在較短時(shí)間內(nèi)成功培育出優(yōu)質(zhì)種苗，為我國西北干旱荒漠區(qū)鹽漬化土地改良及荒漠區(qū)植樹造林苗木的選擇提供參考。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種在較短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)了小與胡楊優(yōu)質(zhì)試管苗的快速繁殖且成活率高的培育方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種小葉楊與胡楊雜交種再生苗的培育方法，包括以下步驟，

S1、建立外植體滅菌及無菌體系：于4～5月份，在室外生長(zhǎng)的小與胡楊植株上剪取長(zhǎng)20～30cm的當(dāng)年生枝條，用軟毛刷蘸取已加入清洗劑的自來水清洗外植體枝條表面的污漬及灰塵，之后用玻璃棒蘸取一滴吐溫80對(duì)枝條進(jìn)行深層清洗，清洗后將外植體枝條置于流水下沖洗4～6個(gè)小時(shí)，之后置于超凈工作臺(tái)上進(jìn)行滅菌處理；

S2、不定芽誘導(dǎo)與增殖：

A)、將完成滅菌處理的外植體材料放置在經(jīng)過高壓滅菌處理并鋪有雙層濾紙的培養(yǎng)皿中，剪除前后兩端切口，保留莖段與葉片部分，莖段剪至長(zhǎng)0.5cm長(zhǎng)的小段，葉片剪至0.5cm×0.5cm的小片，并將四周邊緣部分剪除，之后平鋪接種至不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基表面，用鑷子輕輕按壓使葉片與莖段的切口部分分別與培養(yǎng)基充分接觸，最后進(jìn)行封口培養(yǎng)；

B)、培養(yǎng)條件：接種后首先在暗環(huán)境中培養(yǎng)3天，之后置于溫度24±2℃、光照強(qiáng)度1500～2000lx、光照時(shí)間14h/d的環(huán)境中培養(yǎng)；

S3、生根培養(yǎng)：

(1)選取步驟S2培養(yǎng)30天～40天、生長(zhǎng)健壯、高2～3cm的小與胡楊不定芽為試驗(yàn)材料，剪取不定芽接種于盛有生根培養(yǎng)基的瓶中進(jìn)行封口培養(yǎng)試管苗；