[發明專利]一種能同時檢測對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的方法

有效

• 申請號: 201710719444.4
• 申請日: 2017-08-21
• 公開（公告）號: CN107490640B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 李鷹飛;李川;楊軍令;吳思玚;張躍飛;朱玉華
• 申請（專利權）人: 華潤三九（棗莊）藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/34;G01N30/06
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 張倩倩;李敏

本發明具體涉及一種能同時檢測對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的方法。實驗結果表明，該方法使得對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的定量下限最低可達0.46ng/mL，且各線性回歸方程相關系數均為0.998；各測定物的日內準確度均在85％～111％之間，精密度均低于9％；各測定物的日間準確度均在94％～108％之間，精密度均低于9％。因此，本發明的方法快速、靈敏、準確，適用于大鼠血漿中對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的定量測定。

技術領域

本發明屬于藥物分析領域，具體涉及一種能同時檢測對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的方法。

背景技術

感冒靈顆粒(GML，含APAP 200mg)是20世紀70年代末上市的中西藥復方制劑，具有解熱鎮痛的功效，用于因感冒引起的頭痛、發熱、鼻塞、流涕、咽痛等癥狀的治療。感冒靈顆粒的主要藥效成分的成分之一——對乙酰氨基酚(Acetaminophen，APAP)是臨床常用的非處方解熱鎮痛藥物，治療劑量下安全性較高。

但是一些藥物中APAP含量較高，過量的APAP會導致急性肝損傷發生，甚至造成個體死亡。研究表明，APAP的代謝產物是導致肝損傷發生的主要誘因。因此，建立系統性的APAP及其代謝產物的檢測方法是研究APAP肝臟毒性機制及評價APAP肝毒性的有效手段。

N-乙酰-對-苯醌亞胺(N-Acetyl-p-benzoquinone imine，NAPQI)是對乙酰氨基酚的代謝產物中導致肝損傷的主要活性物質，但無法直接測定但是單一測定該物質不能有效的揭示APAP毒性及解毒機制。為了解決該問題，有文獻報道了；液相色譜-串聯質譜法同時測定對乙酰氨基酚及其中5個血漿代謝產物的方法。然而，一方面，上述方法僅僅可以檢測對乙酰氨基酚的5種血漿代謝產物，定量檢測的代謝產物不全面；另一方面，上述方法中對乙酰氨基酚及其5種血漿代謝產物的定量下限均在μg/ml水平，對更低濃度的5種血漿代謝產物無法實現定量檢測。

因此，研究定量檢測物質更為全面、且定量下限更低的對乙酰氨基酚及其血漿代謝產物的方法對于APAP肝損傷的臨床和實驗室研究具有重要意義，對于感冒靈顆粒的安全用藥具有顯著的臨床指導意義。

發明內容

為此，本發明提供一種能同時檢測對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的方法。

為解決上述技術問題，本發明是通過以下技術方案來實現的：

本發明一種能同時檢測對乙酰氨基酚及其8種血漿代謝產物的方法，所述8種血漿代謝產物為：4-硫酸-對乙酰氨基酚M1、葡萄醛酸化對乙酰氨基酚M2、3-羥基-對乙酰氨基酚M3、3-甲氧基-對乙酰氨基酚M3-3、對乙酰氨基酚谷胱甘肽二鈉鹽M4、3-半胱氨酰-對乙酰氨基酚M5、硫甲基3-嗪-對乙酰氨基酚M5-1、3-N-乙酰-半胱氨硫酰-對乙酰氨基酚M5-2；

各化合物的結構式具體如下：

4-硫酸-對乙酰氨基酚M1：(Acetaminophen-4-O-sulfate)；

葡萄醛酸化對乙酰氨基酚M2：(Acetaminophen-4-O-glucuronide)；

3-羥基-對乙酰氨基酚M3：(3-Hydroxyacetaminophen)；

3-甲氧基-對乙酰氨基酚M3-3：(3-Methoxyacetaminophen)；

對乙酰氨基酚谷胱甘肽二鈉鹽M4：(Acetaminophen-3-glutathione)；

3-半胱氨酰-對乙酰氨基酚M5：(Acetaminophen-3-mercapturate)；

硫甲基3-嗪-對乙酰氨基酚M5-1：(Acetaminophen-3-cysteine)；