[發明專利]一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質的方法

在審

• 申請號: 201710713256.0
• 申請日: 2017-08-18
• 公開（公告）號: CN107581345A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 王亞
• 申請（專利權）人: 合肥豐潔生物科技有限公司
• 主分類號: A23J1/12
• 分類號: A23J1/12;A23J3/32;A23J3/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體是一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質的方法。

背景技術

燕麥是世界八大糧食作物之一,也是我圍北方各省重要的小雜糧作物.燕麥〔oats〕不但營養價值高,而且醫學研究證明,常吃燕麥有降血脂,降血糖和減少心血管疾病的作用.所以美國食品和藥物管理局許可在商標或廣告上宣傳燕麥的降低膽固醇,預防心臟病的作用.國內外科學研究認為,燕麥的保健功能主要歸功于燕麥中可溶性燕麥纖維——β-葡聚糖.它是對人體健康十分有益的—種可溶性膳食纖維(SDF), 這種可溶成分在燕麥麩中的含量遠高于燕麥胚乳,在燕麥麩中為6.6%～11.3%.在去皮的燕麥粉中為3.0%～5.4%。

燕麥麩中的β—葡聚糖含量在4%～10%之間,且可溶部分占65%～90%，由于目前國內對燕麥β—葡聚糖的提取多采用醇析法，且該方面研究不多，大量的燕麥麩僅作為飼料用,經濟效益不高，因此積極開展對燕麥麩的深加工利用,進行β—葡聚糖的提取和研究,有著重大的現實意義和良好的應用前景。

發明內容

本發明的目的在于提供一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質的方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質的方法，包括以下步驟：

S1，取經過清理的燕麥麩皮40重量份，在液氮中研磨成麩皮；

S2，加入麩皮體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜，然后等批次做離心處理，棄上清；

S3，加入等體積的冰浴丙酮，充分攪拌均勻后離心，然后真空干燥沉淀；

S4，加入裂解液，室溫放置30分鐘，使蛋白充分溶于裂解液中，然后離心，取出沉淀，保存在4℃冷藏箱中；

S5，用Brandford法定量蛋白，然后可分裝放入-80℃待包裝。

作為本發明進一步的方案：步驟S2和步驟S3中離心處理的條件參數為：4℃、8000rpm離心1小時。

作為本發明進一步的方案：步驟S4中，離心處理條件參數為：15℃、8000rpm，處理時間以沒有沉淀為標準。

作為本發明進一步的方案：所述提取液為含10%TCA和0.07%的β-巰基乙醇的丙酮。

作為本發明進一步的方案：所述冰浴丙酮為99.3%的丙酮和0.07%β-巰基乙醇的混合溶液。

作為本發明進一步的方案：所述裂解液的制備方法為：將2.7g尿素0.2g CHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中，并在使用前加入1M的DTT65ul/ml。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明針對燕麥麩皮粒度對提取率的影響,通過以丙酮作為提取液進行沉淀提取，得到的提取物色澤佳，質量高，解決了醇析法中大部分β—葡聚糖尚被顆粒所包裹,不能被提取出來且澄清困難，色澤不佳的問題，大大提高了β—葡聚糖的得率。

具體實施方式

下面對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

本發明實施例中，一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質的方法，包括以下步驟：

S1，取經過清理的燕麥麩皮40重量份，在液氮中研磨成麩皮；

S2，加入麩皮體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜，然后等批次做離心處理，棄上清；

S3，加入等體積的冰浴丙酮，充分攪拌均勻后離心，然后真空干燥沉淀；

S4，加入裂解液，室溫放置30分鐘，使蛋白充分溶于裂解液中，然后離心，取出沉淀，保存在4℃冷藏箱中；

S5，用Brandford法定量蛋白，然后可分裝放入-80℃待包裝。

步驟S2和步驟S3中離心處理的條件參數為：4℃、8000rpm離心1小時。

步驟S4中，離心處理條件參數為：15℃、8000rpm，處理時間以沒有沉淀為標準。

所述提取液為含10%TCA和0.07%的β-巰基乙醇的丙酮。

所述冰浴丙酮為99.3%的丙酮和0.07%β-巰基乙醇的混合溶液。

所述裂解液的制備方法為：將2.7g尿素0.2g CHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中，并在使用前加入1M的DTT65ul/ml。