[發(fā)明專利]一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710713256.0 | 申請日: | 2017-08-18 |
| 公開(公告)號: | CN107581345A | 公開(公告)日: | 2018-01-16 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王亞 | 申請(專利權(quán))人: | 合肥豐潔生物科技有限公司 |
| 主分類號: | A23J1/12 | 分類號: | A23J1/12;A23J3/32;A23J3/14 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 230000 安徽省合肥市經(jīng)濟(jì)技*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 丙酮 沉淀 法制 燕麥 組織 蛋白質(zhì) 方法 | ||
1.一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:包括以下步驟:
S1,取經(jīng)過清理的燕麥麩皮40重量份,在液氮中研磨成麩皮;
S2,加入麩皮體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然后等批次做離心處理,棄上清;
S3,加入等體積的冰浴丙酮,充分?jǐn)嚢杈鶆蚝箅x心,然后真空干燥沉淀;
S4,加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心,取出沉淀,保存在4℃冷藏箱中;
S5,用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80℃待包裝。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:步驟S2和步驟S3中離心處理的條件參數(shù)為:4℃、8000rpm離心1小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:步驟S4中,離心處理?xiàng)l件參數(shù)為:15℃、8000rpm,處理時(shí)間以沒有沉淀為標(biāo)準(zhǔn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:所述提取液為含10%TCA和0.07%的β-巰基乙醇的丙酮。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:所述冰浴丙酮為99.3%的丙酮和0.07%β-巰基乙醇的混合溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種丙酮沉淀法制備燕麥組織蛋白質(zhì)的方法,其特征在于:所述裂解液的制備方法為:將2.7g尿素0.2g CHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中,并在使用前加入1M的DTT65ul/ml。
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