[發明專利]一種哺乳動物胚胎細胞的培養方法有效
| 申請號： | 201710707664.5 | 申請日： | 2017-08-17 |
| 公開（公告）號： | CN107365739B | 公開（公告）日： | 2021-03-30 |
| 發明（設計）人： | 羅擎英;劉蜀坤;黎杉珊;劉耀文;張志清;申光輝;吳賀君;陳安均;劉興艷;李美良;蘇趙 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12N5/073 | 分類號： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 于鵬 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 哺乳動物 胚胎 細胞 培養 方法 | ||
1.一種哺乳動物胚胎細胞的培養方法，其特征在于，所述方法在培養時，不加入哺乳動物自身的孕期子宮胎液，且培養分為兩個階段，第一階段為：
將哺乳動物胚胎細胞置于第一培養基中進行培養5.5小時；第一培養基的配方，按重量份計為：
葡萄糖0.4～0.6份、乳酸鈉3.0～3.3份、磷酸二氫鉀0.10～0.12份、碳酸氫鈉1.9～2.2份、透明質酸糖胺多糖3.2～3.3份、檸檬酸鈣0.8～0.9份、IGF Ⅱ0.1～0.2份、牛磺酸0.3～0.9份、二水氯化鈣0.2～0.3份；
所述第一培養基在配制時，除上述成分外，加入水將重量份補足至100份；
第二階段為：
第一階段結束后，移除第一培養基，轉至第二培養基中培養3.5小時；第二培養基的配方，按重量份計為：
葡萄糖0.4～0.6份、乳酸鈉3.0～3.3份、磷酸二氫鉀0.10～0.12份、碳酸氫鈉1.9～2.2份、丙氨酰谷氨酰胺1.9～2.5份、丙酮酸0.1～0.3份、EGF 0.1～0.2份、胰島素0.01～0.05份，牛磺酸0.3～0.9份、二水氯化鈣0.2～0.3份；
所述第二培養基在配制時，除上述成分外，加入水將重量份補足至100份。
所述哺乳動物為牛、羊、狗中的一種。
2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，第一培養基的配方，按重量份計為：葡萄糖0.5份、乳酸鈉3.2份、磷酸二氫鉀0.11份、碳酸氫鈉2.0份、透明質酸糖胺多糖3.3份、檸檬酸鈣0.8份、IGF Ⅱ0.2份、牛磺酸0.6份、二水氯化鈣0.3份；
所述第一培養基在配制時，除上述成分外，加入水將重量份補足至100份。
3.根據權利要求1或2所述的培養方法，其特征在于，第二培養基的配方，按重量份計為：葡萄糖0.5份、乳酸鈉3.1份、磷酸二氫鉀0.12份、碳酸氫鈉2.0份、丙氨酰谷氨酰胺2.2份、丙酮酸0.2份、EGF 0.2份、胰島素0.03份，牛磺酸0.8份、二水氯化鈣0.3份；
所述第二培養基在配制時，除上述成分外，加入水將重量份補足至100份。
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