[發明專利]一種同時分離尿源性干細胞兩種亞群的培養基、分離方法及應用

有效

• 申請號: 201710703587.6
• 申請日: 2017-08-16
• 公開（公告）號: CN107254432B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 解慧琪;陳安靜;皮晉魁;黃益洲
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/0775
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 張娟;劉華玲

本發明提供了一種同時分離人尿源性干細胞不同亞群的培養基，它是由K?SFM培養基和祖細胞培養基等體積混合而成。本發明還提供了所述培養基的用途，及一種人尿源性干細胞的分離培養方法。本發明培養基及分離培養方法，可用于有效分離培養人尿源性干細胞不同亞群，應用前景良好。

技術領域

本發明屬于細胞生物學領域，具體涉及一種同時分離尿源性干細胞兩種亞群的培養基、分離方法及應用。

背景技術

近十年來，間充質干細胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)作為組織工程和再生醫學的種子細胞得到了蓬勃發展，但主要集中于骨髓來源間充質干細胞和脂肪間充質干細胞。2008年，Zhang等人首次從尿液中分離出具有祖細胞特性的一類細胞，隨后證實這類有祖細胞特性的細胞正是干細胞，命名為尿源性干細胞(Urine-derived stem cells，USCs)。相比于其他MSCs，USCs具有取材無創、來源豐富、增殖能力強等優點，是理想的自體干細胞來源，在再生醫藥領域中應用前景廣闊。

已有研究發現，各種MSC例如骨髓來源間充質干細胞(BM-MSCs)、臍帶血來源干細胞(UCBSCs)和羊水來源干細胞(AFPCs)都存在細胞亞群，不同干細胞亞群的形態不同，增殖能力、遷移能力和多向分化能力等生物學特性也不盡相同。更重要的是，不同干細胞亞群間的組織修復能力不同。例如，在視力衰退的治療研究中，長梭形BM-MSCs亞群比表皮樣BM-MSCs亞群的治療效果更好。因此，了解清楚USCs細胞亞群的生物學特征是其用于細胞治療的必要前提。

目前，對USCs的研究尚在初級階段，雖已有少量文獻報道了USCs的生物學特性，但不同文獻報道的USCs形態并不一致。Shantaram Bharadwaj等【S Bharadwaj,G Liu,Y Shi,et al.Characterization of Urine-Derived Stem CellsObtained from Upper UrinaryTract for Usein Cell-Based Urological Tissue Engineering.Tissue Engineering:Part A.2011.17(15-16):2123】研究了來自上尿道的尿液中干細胞的生物學特性，從形態上看，細胞呈現出谷粒狀的形態，折光度較高，在他們公布的后續研究中依然是谷粒狀的形態。然而在Junjie Guan等【JJ Guan,X Niu,FX Gong,et al.BiologicalCharacteristicsof Human-Urine-Derived Stem Cells:Potential for Cell-BasedTherapy in Neurology.Tissue Engineering:Part A.2014.6(13):1794-1806】的研究中公布USCs的形態呈現長梭形的成纖維樣。了解清楚各細胞亞群的生物學特性，是USCs進一步應用于細胞治療和再生修復的必要前提。

但由于現在不同的USCs亞群均是從不同文獻中獨立報道的，對不同USCs亞群的生物學研究可比性較差，不利于USCs的臨床應用。為了保證對USCs不同亞群研究的準確性，盡可能減少不同實驗室、不同檢測體系的誤差，迫切需要研發一種能夠同時分離USCs不同亞群的分離方法，以滿足實際應用的需求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種同時分離尿源性干細胞兩種亞群的培養基、細胞分離方法及應用。

本發明提供了一種同時分離人尿源性干細胞不同亞群的培養基，它是由K-SFM培養基和祖細胞培養基等體積混合而成，