[發(fā)明專利]一種可以檢測胃癌、肝癌、結(jié)腸癌的組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710701492.0
• 申請日: 2015-11-16
• 公開（公告）號: CN107505458B
• 公開（公告）日: 2019-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王澤珩;其他發(fā)明人請求不公開姓名
• 申請（專利權(quán)）人: 王澤珩
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N33/559
• 代理公司: 重慶市諾興專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50239
• 代理人: 劉興順

1.一種可以檢測多種腫瘤的組合物，其特征在于，是由多種識別腫瘤特異性抗原的抗體、聚合物、膠體金溶液組成；其制備方法為：將所述多種識別腫瘤特異性抗原的抗體分別用膠體金標(biāo)記后，與所述聚合物形成包含多種膠體金標(biāo)記的用于識別不同腫瘤特異性抗原的抗體的共聚物；

將所述包含多種膠體金標(biāo)記的用于識別不同腫瘤特異性抗原的抗體的共聚物作為抗體載體參加免疫濁度反應(yīng)，可作為檢測多種腫瘤的免疫增強(qiáng)體外診斷試劑；

所述聚合物為可生物降解的聚合物；

所述可生物降解的聚合物選自聚羥基醋酸、聚羥基丁酸酯、乳酸-聚乙二醇共聚物、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物或聚羥基烷基醇酯中的任意一種；

所述腫瘤包括胃癌、肝癌、結(jié)腸癌；

所述用于識別胃癌特異性抗原的抗體為抗S100P蛋白多克隆抗體；所述用于識別肝癌特異性抗原的抗體為人肝癌組織AFU多克隆抗體；所述用于識別結(jié)腸癌特異性抗原的抗體為結(jié)腸癌抗原3抗體；

所述納米金標(biāo)記的識別腫瘤特異性抗原的抗體共聚物制備方法為：

(1)制備膠體金溶液：用質(zhì)量百分比濃度為1％的檸檬酸三鈉水溶液與質(zhì)量百分比濃度為0.01％氯金酸水溶液，按1.5mL:100mL的體積比，將氯金酸溶液加熱至沸騰，把檸檬酸三鈉水溶液快速加入其中，攪拌反應(yīng)至所得的反應(yīng)液為酒紅色，再加熱10min，直至溶液透亮，冷至室溫，然后用碳酸鉀水溶液調(diào)節(jié)p值為6.5～7.0，即得膠體金溶液；

(2)在步驟(1)所得的膠體金溶液中在磁力攪拌下緩慢加入濃度為10～30μg/mL的用于識別胃癌特異性抗原的抗體水溶液，混勻，37℃孵育30min，加封閉液繼續(xù)37℃孵育22～23.5min，14000rpm，4℃條件下離心20～21min，去除上清液，稀釋液重懸沉淀并洗滌一次，得到膠體金-抗S100P蛋白多克隆抗體標(biāo)記物Ⅰ；

另取步驟(1)所得的膠體金溶液，加入濃度為10～50μg/mL的用于識別肝癌特異性抗原的抗體水溶液，按照上述制備膠體金-抗S100P蛋白多克隆抗體標(biāo)記物Ⅰ同樣的操作方法，得到膠體金-人肝癌組織AFU多克隆抗體標(biāo)記物Ⅱ；

另取步驟(1)所得的膠體金溶液，加入濃度為10～50μg/mL的用于識別結(jié)腸癌特異性抗原的抗體水溶液，按照上述制備膠體金-抗S100P蛋白多克隆抗體標(biāo)記物Ⅰ同樣的操作方法，得到膠體金-結(jié)腸癌抗原3抗體標(biāo)記物Ⅲ；

(3)將所述聚合物溶于二氯甲烷，加入上述步驟(2)制得的標(biāo)記物Ⅰ、標(biāo)記物Ⅱ、標(biāo)記物Ⅲ，用超聲波處理30～45s，得到膠體金標(biāo)記的識別胃癌、肝癌、結(jié)腸癌三種腫瘤的特異性抗原的抗體共聚物；

所述的膠體金-抗S100P蛋白多克隆抗體標(biāo)記物Ⅰ，按質(zhì)量比計算，即膠體金:抗S100P蛋白多克隆抗體為5:0.21～0.22；所述的膠體金-人肝癌組織AFU多克隆抗體標(biāo)記物Ⅱ，按質(zhì)量比計算，即膠體金:人肝癌組織AFU多克隆抗體為5:0.25～0.265；所述的膠體金-結(jié)腸癌抗原3抗體標(biāo)記物Ⅲ，按質(zhì)量比計算，即膠體金:結(jié)腸癌抗原3抗體為5:0.23～0.245；

所述超聲波處理的頻率為35～55KHz；

所述封閉液為含牛血清蛋白的洗滌液，其質(zhì)量濃度為0.3～0.65mg/mL。