[發(fā)明專利]一種具有酶靶向性和緩控釋特性的給藥納米粒的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710694245.2
• 申請日: 2017-08-14
• 公開（公告）號: CN107744515A
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發(fā)明（設計）人: 楊根生;郭鈁元;吳江青;吳文超;張逸菲
• 申請（專利權）人: 浙江工業(yè)大學
• 主分類號: A61K9/52
• 分類號: A61K9/52;A61K31/12;A61K47/42;A61P35/00
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務所(普通合伙)33230
• 代理人: 馮年群

技術領域：

本發(fā)明涉及藥物高分子載體制備和藥物制劑技術領域，具體的說提供一種具有酶靶向性和緩控釋特性的給藥納米粒的制備方法。

背景技術：

癌癥是當前危害人類健康的主要殺手，常規(guī)腫瘤療法主要是手術療法、放射療法和化學療法。其中，化學療法患者順應性較好，是較為理想的選擇。然而，大多數(shù)的化學治療藥物在使用過程中毒副作用較大，且大多數(shù)為親脂性藥物，常常面臨著靶向性控釋和溶解性差的難題。因此眾多研究試圖通過開發(fā)一種只針對腫瘤細胞而對正常細胞不產(chǎn)生任何毒副作用的理想新劑型，進而降低藥物的毒副作用及提高藥物的輸送能力。

理想的抗腫瘤藥物載體應具有以下幾個特點：良好的靶向性，到達腫瘤部位后能有效積累并快速釋放藥物；在體循環(huán)中有較好的穩(wěn)定性；對正常細胞毒副作用低；生物利用率高。

兩親性聚合物膠束用作藥物載體的一個重要契機是。兩親性嵌段共聚物在水溶液中能夠自組裝形成具有核殼結構的聚合物膠束，聚合物膠束具有一個脂質的核，它可以包載親脂性的化合物。聚合物的這種核狀結構對載藥膠束藥物的釋放具有深遠的影響。在聚合物自組裝過程中，水難溶性藥物可以通過化學鍵合、物理包埋或靜電作用加載在粒子的內核中，實現(xiàn)疏水藥物的增溶，同時降低了外界環(huán)境對藥物活性的影響。

腫瘤組織與正常組織相比，一些特異性酶往往具有更豐富的表達。基于此種差異，設計酶敏感型-納米載體，用于腫瘤的主動靶向治療。研究表明，MMPs在腫瘤細胞中特異性高表達，且其響應能力具有高特異性和高敏感度。因此，使用相應MMPs剪切肽對傳統(tǒng)納米給藥體系進行修飾，即可實現(xiàn)酶觸發(fā)機制的腫瘤主動靶向給藥，提高藥物生物利用度。

發(fā)明內容：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有酶靶向性和緩控釋特性的給藥納米粒的制備方法，本發(fā)明的方法通過高溫聚合、常溫開環(huán)和酯化等反應獲得三嵌段兩親性高聚物(mPEG-Peptide-PCL)，以mPEG-Peptide-PCL為藥物載體(其中mPEG修飾可以提高載體在體內的循環(huán)時間，

選擇XGPLGIAGQr9X為剪切肽，以腫瘤細胞特異性表達MMPs為靶點實現(xiàn)載體的主動靶向性，PCL作為藥物的主要包載片段)；以姜黃提取物姜黃素 (FDA認證第三代抗癌化學預防藥)為模型藥物，通過溶劑乳化揮發(fā)法制備尺寸較小、粒徑均一、包封率高的具有特異靶向性和緩控釋特性的載姜黃素-納米粒制劑。所得姜黃素-納米粒制劑的平均粒徑100～300nm，多分散指數(shù)(PDI)小于0.3，包封率大于70％。

本發(fā)明解決其技術問題采用的技術方案如下：

一種具有酶靶向性和緩控釋特性的給藥納米粒的制備方法，

第一步，MPEG-Peptide-PCL的制備

(1)PCL-NHtBoc的合成

取100ml三口燒瓶，加入一定量N-(叔丁氧羰基)乙醇胺和己內酯，辛酸亞錫為催化劑，在N₂保護條件下120-140℃油浴反應12-24h。反應結束后，趁熱用二氯甲烷(DCM)溶解，然后逐滴加到冰甲醇中沉淀，抽濾，收集濾餅，并將產(chǎn)物置于40℃真空干燥箱干燥24小時至恒重，密封保存?zhèn)溆茫?/p>

所述N-(叔丁氧羰基)乙醇胺、ε-己內酯、辛酸亞錫的投料物質的量之比為1：15～23：0.000018～0.00006，優(yōu)選1∶15～18∶0.00002～0.000048；

所述二氯甲烷的體積用量以所述ε-己內酯的質量計為2～3mL/g；

所述冰甲醇的體積用量以所述ε-己內酯的質量計為20～30mL/g；

(2)PCL-NH₂的合成

取PCL-NHtBoc溶于DCM，同時加入三氟乙酸(TFA)，0℃攪拌反應3-5h。反應結束后加DCM定容，用飽和NaHCO₃溶液和蒸餾水各洗滌 3次。取下層溶有產(chǎn)物的DCM層。然后逐滴加到冰乙醚中析出沉淀，抽濾，收集濾餅并將產(chǎn)物置于40℃真空干燥箱干燥24小時至恒重，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

所述PCL-NHtBoc、三氟乙酸(TFA)的投料物質的量之比為1： 150～230，優(yōu)選1：150～180；

所述PCL-NHtBoc的DCM溶液濃度為0.08～0.25g/ml；

所述沉淀過程二氯甲烷和冰乙醚的體積比范圍為1∶1.5～3；

GPC檢測PCL-NH₂分子量范圍在4800～8000；

(3)mPEG-COOH的合成