[發(fā)明專利]一種測定養(yǎng)殖水中多獸藥殘留的分析方法

有效

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• 申請日: 2017-08-14
• 公開（公告）號: CN107255686B
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設計）人: 張憲臣;華洪波;李浩洋;張朋杰;盧俊文;容裕棠
• 申請（專利權）人: 中山出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 中山市科創(chuàng)專利代理有限公司 44211
• 代理人: 毛海娟

本發(fā)明公開了一種測定養(yǎng)殖水中多獸藥殘留的分析方法，包括以下步驟：(1)標準溶液配制；(2)超聲輔助提取；(3)分散液液微萃取；(4)超高效液相色譜?高分辨質譜儀分析。本發(fā)明能夠節(jié)省大量對人體有害的有機溶劑的使用，具有靈敏，準確，省時，穩(wěn)定，精密度高，重現(xiàn)性好等優(yōu)點，適合于大批量的檢測養(yǎng)殖水樣品。

【技術領域】

本發(fā)明涉及一種測定養(yǎng)殖水中多獸藥殘留的分析方法，特別是一種利用超聲輔助分散液液微萃取-超高效液相色譜-高分辨質譜測定養(yǎng)殖水中多獸藥殘留的分析方法，屬于食品化學分析技術領域。

【背景技術】

現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)日益趨向于規(guī)模化、集約化，使用抗生素、激素等，更成為保障水產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展必不可少的一環(huán)。但是由于科學知識的缺乏和經(jīng)濟利益的驅使，在水產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)中濫用藥物的現(xiàn)象普遍存在，在我國情況尤為嚴重。濫用獸藥的直接后果是導致獸藥在動物性食品中的殘留，攝入人體后，影響人類的健康。水產(chǎn)品中獸藥的使用與殘留越來越受到廣泛的關注，許多國家和國際組織均制定了水產(chǎn)品中藥物殘留的限制標準。日本從2006年5月29日實施的《食品中殘留農(nóng)藥的肯定列表制度》中對涉及水產(chǎn)品的134種化學藥物殘留量限定。美國FDA對水產(chǎn)品進口要檢查221種化學藥物的殘留，嚴禁使用的藥品有10種。歐盟、加拿大、韓國等國家近幾年也相應地提高了水產(chǎn)品藥物殘留的限制。多數(shù)的獸藥是通過養(yǎng)殖水進入到水產(chǎn)品體內(nèi)，因此對養(yǎng)殖水進行監(jiān)控檢測能夠有效的從源頭對水產(chǎn)品中獸藥濫用情況進行控制。

養(yǎng)殖水中獸藥殘留檢測方法主要有酶聯(lián)免疫法、高效液相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質譜法(GC-MS)、液相色譜-串聯(lián)質譜法(LC-MS/MS)和液相色譜-高分辨質譜法。其中酶聯(lián)免疫法易出現(xiàn)假陽性結果和交叉反應；高效液相色譜法的抗干擾能力差，靈敏度低且不能滿足標準限值的要求；GC-MS方法需對樣品進行繁瑣的衍生化處理；LC-MS/MS技術無需衍生化處理，而且在滿足多組分同時檢測的情況下仍有較好的選擇性、靈敏度和特異性，彌補了前幾種方法的缺陷，但是其難以完全闡明化合物的結構裂解信息，定性準確度方面尚有欠缺，容易產(chǎn)生假陽性的結果。養(yǎng)殖水中獸藥殘留的檢測的前處理方法包括固相萃取、液液萃取等方法，這些方法使用有機試劑多，易對環(huán)境造成污染，同時實驗所需時間較長。

四極桿/靜電場軌道阱高分辨質譜儀(Q-Exactive)具有分辨率高及定量能力好的優(yōu)點，不同于三重四極桿低分辨質譜使用多反應監(jiān)測模式通過目標物的離子對進行定量分析，高分辨質譜可以利用目標物母離子的精確分子量直接定量，無需對目標物逐個優(yōu)化子離子及相關參數(shù)，對于多目標物分析可以極大地降低檢測方法的時間，同時又能很好地避免低分辨質譜易受基質干擾而產(chǎn)生假陽性的現(xiàn)象。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種使用UA-DLLEM-UPLC-Q Exactive Orbitrap MS測定養(yǎng)殖水中21種獸藥殘留的的檢測方法，填補現(xiàn)有檢測技術的空白。

本發(fā)明為了實現(xiàn)上述目的，采用以下技術方案：

一種測定養(yǎng)殖水中多獸藥殘留的分析方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)標準溶液配制；

(2)超聲輔助提取：

稱取50mL養(yǎng)殖水樣品，在10℃條件下14000r/min離心10min，取上清液5.0ml，50℃超聲提取10min，上清液移入10ml錐形離心管中并加入0.3gNaCl，渦旋溶解2min，用乙酸溶液調(diào)pH至4.5；

(3)分散液液微萃取：將200μL分散劑異丙醇和50μL萃取劑CHCl₃混合，用1mL的玻璃注射器迅速注入(2)溶液中，輕晃離心管，混合形成水、異丙醇、三氯甲烷的乳濁液，以4500r/min離心5min，離心后的下層溶液用50μL微型注射器取20μL，進行超高效液相色譜—高分辨質譜檢測；

(4)超高效液相色譜-高分辨質譜儀分析。