[發明專利]高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒及其使用方法

有效

• 申請號: 201710681745.2
• 申請日: 2017-08-10
• 公開（公告）號: CN107449748B
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 鄭佳;孫文勇;常俊駿;梁芬
• 申請（專利權）人: 東軟威特曼生物科技（南京）有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 北京中企鴻陽知識產權代理事務所(普通合伙) 11487
• 代理人: 郭鴻雁

1.一種高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于：試劑盒包括試劑1，試劑1包括：膽固醇氧化酶和膽固醇酯酶，試劑盒還包括試劑2；

所述試劑1包括：

表面活性劑泊洛沙姆系列 1~3g/L；

聚乙烯硫酸鹽 1~10g/L；

十二烷基硫酸鈉 1~5g/L；

復合穩定劑 1wt%；

氯化鈣 30~50g/L；

膽固醇氧化酶 5~10KU/L；

膽固醇酯酶 5~8KU/L；

抗壞血酸氧化酶 3~10KU/L；

過氧化氫酶 1~3KU/L；

4-氨基安替比林 1~5g/L；

proclin系列防腐劑 0.01~5g/L；

乙二醇 15~25ml/L；

蔗糖 10~30g/L；

其余為GOOD’S緩沖液，所述GOOD’S緩沖液pH值為7.0；

所述試劑2包括：

表面活性劑脂肪醇聚氧乙烯醚系列 2~5g/L；

聚氧乙烯亞烷基三芐基 1~8g/L；

乙二醇 15~25ml/L；

蔗糖 10~30g/L；

過氧化物酶 1~4KU/L；

顯色劑TOPS 1~5g/L；

疊氮鈉 0.01~5g/L；

其余為GOOD’S緩沖液，所述GOOD’S緩沖液pH值為7.0。

2. 根據權利要求1所述的高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于：所述復合穩定劑包括吐溫80 10~13g/L，谷氨酸20~30g/L，谷胱甘肽1~3g/L，海藻糖50~60g/L，十二烷基二甲基甜菜堿2~6g/L，卵磷脂3~6g/L，緩沖液100~120mmol/L。

3.根據權利要求1所述的高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于：

所述試劑1包括：

表面活性劑泊洛沙姆系列 2g/L；

聚乙烯硫酸鹽 5.5g/L；

十二烷基硫酸鈉 3g/L；

復合穩定劑 1wt%；

氯化鈣 40g/L；

膽固醇氧化酶 7.5 KU/L；

膽固醇酯酶 6.5KU/L；

抗壞血酸氧化酶 6.5KU/L；

過氧化氫酶 2KU/L；

4-氨基安替比林 3g/L；

proclin系列防腐劑 2.5g/L；

乙二醇 20ml/L；

蔗糖 25g/L；

其余為GOOD’S緩沖液，所述GOOD’S緩沖液pH值為7.0；

所述試劑2包括：

表面活性劑脂肪醇聚氧乙烯醚系列 3.5g/L；

聚氧乙烯亞烷基三芐基 4g/L；

乙二醇 20ml/L；

蔗糖 20 g/L；

過氧化物酶 2.5 KU/L；

顯色劑 TOPS 3 g/L；

疊氮鈉 2.5 g/L；

其余為GOOD’S緩沖液，所述GOOD’S緩沖液pH值為7.0。

4.根據權利要求1所述的高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒，其特征在于：其使用方法包括以下步驟：

（1）將300份試劑1和3份待測樣品混合均勻，37℃孵育后得到反應液1；

（2）然后加入100份試劑2混合均勻，得到反應液2，測定反應液2的吸光度A1；

（3）5min后再次測反應液2的吸光度A2，測定主波長為600nm、副波長為700nm；

（4）用步驟（1）-（3）的操作對高密度脂蛋白膽固醇標準液的吸光度進行測定，分別得到吸光度A3和A4，測定主波長為600nm、副波長為700nm；

（5）用吸光度差值進行計算，根據式1計算高密度脂蛋白膽固醇濃度；

式1：

高密度脂蛋白膽固醇濃度=△A樣品/ΔA標準液×標準液濃度；

△A樣品=A2-A1；

ΔA標準液=A4-A3；

上述份數均為體積份數。