[發明專利]含硒大分子熒光探針及其制備方法

有效

• 申請號: 201710674188.1
• 申請日: 2017-08-09
• 公開（公告）號: CN107325211B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 朱健;劉倩;李娜;潘向強;朱秀林
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C08F112/08
• 分類號: C08F112/08;C08F120/28;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 李陽

本發明涉及一種含硒大分子熒光探針的制備方法，包括以下步驟：將鄰位鹵代苯甲醛、二硒化鈉在有機溶劑中，在90?120℃下反應，得到2,2′?二醛基二苯基二硒醚；將2,2′?二醛基二苯基二硒醚與2,4?二甲基吡咯在催化劑的作用下進行反應，然后向其中加入氧化劑繼續反應，再加入有機堿和絡合劑，反應后得到2,2′?二氟硼二吡咯二苯基二硒醚，以上反應在20?40℃下進行；將2,2′?二氟硼二吡咯二苯基二硒醚與含雙鍵化合物在20?70℃下進行自由基聚合反應，得到含硒大分子熒光探針。本發明還公開了一種采用上述方法所制備的含硒大分子熒光探針。本發明的方法，首先制備出含硒的二硒醚，然后利用其調控單體的聚合，得到含硒大分子熒光探針，并將其用于氧化物的檢測。

技術領域

本發明涉及有機化學合成領域，尤其涉及一種含硒大分子熒光探針及其制備方法。

背景技術

生物體在進行有氧呼吸的過程中，會產生多種活性氧自由基，這些自由基會產生相應的生理學和病理學作用。在可控范圍內，活性氧自由基可以與還原型物質作用，來調節細胞信號傳遞。如果這些活性氧自由基的含量失去控制，會對蛋白質、脂質、核酸產生損害，進而有可能引發多種疾病。由于活性氧自由基的半衰期短，在體力濃度很低，因此實時檢測生物體系中活性氧自由基的水平，成為科學家們的研究重點。活性氧自由基的熒光檢測手段靈敏度高、設備簡單、有利于生物樣品的測定，目前已經很多熒光探針成功應用于活性氧自由基的檢測。

硒元素是人體中一種重要的微量元素。自十九世紀七十年代以來，科學家首次在細胞內的酶中發現了硒元素，并確認硒元素是抗氧化還原酶的活性位點的重要組成部分，此后有機硒化學取得了飛速發展。由于其抗氧化、抗癌及抗菌能力，有機硒化合物在制藥方面、藥物化學、細菌酶學等方面得到了廣泛研究。最近，利用硒元素的氧化還原特性，有機硒化合物在化學計量型熒光探針及化學傳感器方面被深入研究，多種有機硒化合物被合成并應用于檢測活性氧自由基(ROS)、活性氮自由基(RNS)及生物硫醇。在化學傳感領域，含硒熒光探針是一種重要的高效動態檢測方式。

目前，小分子含硒熒光探針已經得到了較為廣泛的發展。2007年有文章報道了一種含硒熒光探針，將Se-N鍵引入到熒光染料羅丹明6G中，雖然熒光探針本身熒光較弱，但Se-N鍵斷開時，恢復母體羅丹明6G的結構，從而使熒光增強。該熒光探針具有較高的選擇性，但熒光背景高，信噪比低，適用范圍小。2009年還出現了一種以羅丹明110為母體的基于Se-N鍵的熒光探針，該探針的針對性強，檢測迅速并且信噪比高，成功應用于生物細胞成像。2013年中國科學院大連化物所合成了一種二硒醚類的氧化還原可逆有機硒熒光探針，該探針靈敏度高，選擇性好，并且對硫醇的檢測具有可逆性。2014年，有文章報道了一種BODIPY類型的二硒醚，實現了對KO₂的檢測。該探針信噪比低，對KO₂有較高的選擇性，在生物硫醇的條件下實現了可逆。

但是，含硒小分子熒光探針具有水溶性、穩定性較差的缺點。而含硒大分子熒光探針的研究仍未有報道。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種含硒大分子熒光探針及其制備方法，使用本發明的方法制備的含硒大分子熒光探針，在目標檢測物存在條件下，具有明顯的熒光強度變化。

本發明提供了一種含硒大分子熒光探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將鄰位鹵代苯甲醛、二硒化鈉(Na₂Se₂)在有機溶劑中，在90-120℃下反應10-50h，得到2,2′-二醛基二苯基二硒醚；

(2)將2,2′-二醛基二苯基二硒醚與2,4-二甲基吡咯在催化劑的作用下在溶劑中反應3-12h，然后向其中加入氧化劑繼續反應10-60min，再加入有機堿和絡合劑，反應1-12h后得到2,2′-二氟硼二吡咯二苯基二硒醚，以上反應在20-40℃下進行；