[發明專利]用于鑒定桉樹無性系的STR引物及其應用

有效

• 申請號: 201710671363.1
• 申請日: 2017-08-08
• 公開（公告）號: CN107385052B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 周長品;李昌榮;李發根;翁啟杰;陳升侃;王莉;甘四明
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院熱帶林業研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

本發明公開了用于鑒定桉樹無性系的STR引物及其應用。本發明通過大量的STR標記分型檢測，篩選出了8對多態性高、擴增條帶清晰的桉樹STR引物用于鑒定桉樹無性系，并建立了多重熒光檢測體系。將該STR引物組用于鑒定桉樹無性系，具有效率高、檢測準確、操作方便等優勢。本發明可有效甄別假冒和錯亂的無性系，切實保障良種培育人和營林種植者的權益；并可為今后快速進行桉樹種質資源遺傳評價、遺傳圖譜構建、分子標記輔助育種、無性系指紋圖譜構建和鑒定提供重要的技術支撐。

技術領域

本發明屬于分子標記技術領域，具體涉及用于鑒定桉樹無性系的STR引物及其應用。

背景技術

桉樹是桃金娘科(Myrtaceae)桉屬(Eucalyptus)樹種的總稱，是全球三大造林樹種之一。桉樹因其遺傳多樣性豐富、生長迅速、木材產量高和適應性強等特點，在華南地區廣泛種植，為緩解我國木材供求緊張的局面發揮了重要的作用。

生產中桉樹主要以無性系進行繁殖，隨著無性系擴繁代數的增加、推廣范圍的擴大和流通市場的拓展，無性系混亂的問題日益嚴重，一些無性系名稱在組培室和苗圃中被錯誤記錄，市場上還存在以次充好、將表型相似的不良無性系作為優良無性系銷售的現象，這極大地損害了種植者的效益。此外，一些單位將別人培育的無性系重新命名、據為己有，不利于知識產權的保護。因此，對桉樹無性系進行鑒別尤為重要。

國際植物新品種保護聯盟(UPOV,International Union for the Protection ofNew Varieties of Plants)對無性系鑒定的傳統方法包括：葉片形態、樹皮紋理以及果實性狀等一系列形態學以及其它的一些解剖學特征，不同人判定標準難以統一，極易造成鑒定不準確，影響生產。DNA分子標記，尤其是短串聯重復序列(short tandem repeat,STR)具有多態信息含量高、共顯性遺傳、技術簡單、重復性好、特異性強等特點，可以為某一品種提供獨特的多態性信息，可以用于植物品種準確的檢測和鑒定。目前DNA分子標記已廣泛應用于許多農作物的種質資源鑒定，桉樹中也相繼在不同無性系開展了一定的DNA指紋圖譜分析工作，但仍沒有一套簡單易行的STR檢測體系和常用桉樹無性系的檢測方法。

發明內容

本發明的目的是針對目前桉樹無性系種植情況和現有鑒定方法的缺點與不足，提供一組用于鑒定桉樹無性系的STR引物，其可以在桉樹常用無性系中進行快捷、方便鑒定的應用。本發明通過構建桉樹無性系的分子鑒定體系，建立桉樹無性系指紋圖譜，能有效甄別假冒和錯亂的無性系，切實保障良種培育人和營林種植者的權益，提高桉樹商品林發展良種化程度。

本發明的第一個目的是提供用于鑒定桉樹無性系的STR引物。

本發明的用于鑒定桉樹無性系的STR引物，包括以下8對引物：

(1)EUCeSSR0475引物：其正向引物如SEQ ID NO.1所示，其反向引物如SEQ IDNO.2所示；

(2)EUCeSSR0204引物：其正向引物如SEQ ID NO.3所示，其反向引物如SEQ IDNO.4所示；

(3)EUCeSSR419引物：其正向引物如SEQ ID NO.5所示，其反向引物如SEQ ID NO.6所示；

(4)EUCeSSR1128引物：其正向引物如SEQ ID NO.7所示，其反向引物如SEQ IDNO.8所示；

(5)EUCeSSR298引物：其正向引物如SEQ ID NO.9所示，其反向引物如SEQ IDNO.10所示；

(6)EUCeSSR0176引物：其正向引物如SEQ ID NO.11所示，其反向引物如SEQ IDNO.12所示；

(7)EUCeSSR181引物：其正向引物如SEQ ID NO.13所示，其反向引物如SEQ IDNO.14所示；