[發明專利]一種利用色譜-3和動態軸向壓縮柱色譜法純化制備高純度鵝去氧膽酸的方法

有效

• 申請號: 201710669145.4
• 申請日: 2017-08-08
• 公開（公告）號: CN107573396B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 張建超;尤朋濤
• 申請（專利權）人: 湖北中醫藥大學
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 喬宇

本發明涉及鵝去氧膽酸的純化方法，具體涉及一種利用色譜?3柱色譜和動態軸向壓縮柱色譜兩步法純化制備高純度鵝去氧膽酸的方法。其步驟為：將待純化處理的低含量的CDCA樣品用裝填聚苯乙烯/二乙烯基苯型色譜填料的色譜?3柱色譜分離純化，獲得CDCA粗品，然后將CDCA粗品動態軸向壓縮柱色譜分離純化，獲得高純度CDCA。本發明工藝可純化15?20％純度的鵝去氧膽酸得到70?80％純度的CDCA，再經DAC純化可得到純度97.5％以上，收率在90％以上，是一種高效、環保、適用性強的工業制備高純度鵝去氧膽酸的分離純化方法，可以輕易實現從實驗室到工業化鵝去氧膽酸單體的高效分離純化。

技術領域

本發明涉及鵝去氧膽酸的純化方法，具體涉及利用色譜-3和動態軸向壓縮柱色譜法純化制備高純度鵝去氧膽酸的方法。

背景技術

熊去氧膽酸(ursodeoxycholic acid，UDCA)，化學名為3α,7β-二羥基-5β-膽烷-24-酸，是一種具有無毒性的親水膽酸，具有廣泛的治療作用。目前熊去氧膽酸主要用于治療固醇性膽結石、原發性硬化性膽管炎、膽源性膜腺炎和膽汁反流性胃炎等疾病，也是用于治療膽汁淤積性肝病的首選藥物，并且可以用于治療慢性肝炎和肝移植后排斥反應，臨床效果良好。熊去氧膽酸是熊類膽汁中特有的膽汁酸成分，結構式如通式⑴所示：

目前獲得熊去氧膽酸的方法主要有兩種。第一種方法是通過養殖熊，然后通過活體引流的方法取其的膽汁，再經提取分離得到熊去氧膽酸。但該方法的效率不高，時間周期較長，且較大程度上傷害了熊的身體。第二種是通過其他原料合成熊去氧膽酸，如鵝去氧膽酸合成熊去氧膽酸。鵝去氧膽酸(Chenodeoxycholic acid，CDCA)是UDCA的7α差向異構體，化學名為3α,7α-二羥基-5β-膽烷-24-酸。其結構式如通式⑵所示：

文獻報道CDCA合成UDCA的路線主要有3種。①以CDCA為原料，經甲酯化、選擇性保護羥基、Jones試劑氧化、金屬鈉和二氯化鎳還原得UDCA，總收率42％。②以CDCA為原料，在800℃、選用高專一性復合型Ni-Al₂O₃催化劑、高壓、加氫還原制得UDCA，總收率65％。③以7-酮石膽酸為原料，用氫氣-Raney鎳高壓還原或電化學還原得到UDCA，收率大于90％。其中7-酮石膽酸的合成可以CDCA為原料，丙酮和水為介質，經N-溴代丁二酰亞胺(NBS)氧化制得，收率達89％。

鵝去氧膽酸本身是目前世界上用量最大的治療膽結石藥物之一，同時也是合成熊去氧膽酸和其他甾體化合物的主要醫藥中間體原料。由于鵝去氧膽酸的來源比較廣泛，可以從其他動物的膽中獲得，例如雞膽、鴨膽和豬膽，所以在工業上，通常采用鵝去氧膽酸合成熊去氧膽酸。傳統制備CDCA的方法具有普遍性的不足，例如：產品收率較低，純度不高等。上世紀80年使用的酒精法和鹽析法方法落后繁瑣，所得產品純度較低，僅60％左右(商業部動物生物制藥學，人民衛生出版社，1980：256)，該方法現基本不采用。CN102827234A公開了利用鴨膽汁提取鵝去氧膽酸的方法，但該方法大量使用乙酸乙酯、污染性大、工藝參數可重復性差；而CN1775798A公開的利用禽類膽汁提取鵝去氧膽酸的方法，由于該方法經皂化之后直接進用大孔樹脂進行分離純化，分離效果差，再進行超濾純化，增加了該工藝的復雜性，使CDCA損失增多。2012年10月03日中國專利CN102703556A公開了“一種大孔樹脂分離鴨膽汁中鵝去氧膽酸的方法”。該工藝分為兩步：第一步為微生物溶液制作，第二步為大孔樹脂分離鴨膽汁中鵝去氧膽酸。該工藝操作比較復雜，耗時也較長，采用了甲醇等有毒有機溶劑及較多種類的無機試劑。

綜上現有技術鵝去氧膽酸的純化方法主要存在如下不足：1.大量使用有毒有害有機溶劑，污染大，對操作人員造成傷害。2.工藝復雜，可重復性差。3.產品純度及收率低，達不到市場對鵝去氧膽酸產品高純度(95％以上)的要求。

發明內容