[發明專利]倒地鈴的組織培養快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201710662384.7
• 申請日: 2017-08-04
• 公開（公告）號: CN107242137B
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發明（設計）人: 黃小燕;韋榮昌
• 申請（專利權）人: 黃小燕
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G7/04;A01N65/12;A01N59/00;A01P1/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 靳浩

本發明公開了一種倒地鈴的組織培養快速繁殖方法，包括以下步驟：外植體處理：取倒地鈴種子作為外植體，用羽衣草浸提液浸泡10～15min；外植體培養：處理后的外植體接種到含有L?硒甲基硒代半胱氨酸、維生素C和牛磺酸的MS外植體培養基中；繁殖培養；壯苗培養：將繁殖培養得到的試管苗叢生芽置于MS壯苗培養基中，MS壯苗培養基含有L?硒甲基硒代半胱氨酸、活性炭、卡那霉素，還添加有托瑪琳石粉和遠紅外陶瓷粉；生根培養；以及煉苗與移栽。本發明能降低組培苗的褐化率、玻璃化率，提高移栽成活率，同時提高倒地鈴的成苗率，能實現倒地鈴的快速繁殖，從而實現倒地鈴的規模化繁育。

技術領域

本發明涉及倒地鈴的繁育技術領域，具體地說是一種倒地鈴的組織培養快速繁殖方法。

背景技術

倒地鈴亦稱心豆藤或白心籽，還有假苦瓜、風船葛、帶藤苦楝、燈籠草的別名，無患子科多年生木質藤本植物，是一種中藥材，具有清熱、利尿、涼血、去瘀、解毒之效，能治肺炎、黃疸、糖尿病、淋病、疔瘡、風濕、跌打損傷、蛇咬傷等，同時也是一種常見的觀賞植物。倒地鈴花為白色，果膨大近球形，種子黑色，有心形的白斑。倒地鈴通常是作為一年生植物，由種子播種繁育而成，但是傳統的播種繁殖法的出芽率和成苗率都不高，阻礙了倒地鈴的快速規模化繁殖，因此迫切需要一種能夠實現倒地鈴種子快速繁育的方法。

發明內容

本發明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是提供一種倒地鈴的組織培養快速繁殖方法。其通過外植體處理、外植體培養、繁殖培養、壯苗培養、生根培養以及煉苗與移栽，提高倒地鈴的成苗率，能實現倒地鈴的快速繁殖，實現倒地鈴的規模化繁育。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了一種倒地鈴的組織培養快速繁殖方法，包括以下步驟：

S1、外植體處理：取倒地鈴種子作為外植體，先用羽衣草浸提液浸泡10～15min，然后用蒸餾水沖洗5～10min，再用質量分數為2％～5％次氯酸鈉溶液浸泡10～15min，再用無菌水沖洗15～20min，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到處理后的外植體；

其中，所述羽衣草浸提液由以下重量份數組分制成：新鮮羽衣草50～60份、新鮮接骨木葉片10～15份、新鮮紅蘭花8～10份、乙醇10～15份以及無菌水300～500份；將上述重量份數的新鮮羽衣草、新鮮接骨木葉片、新鮮紅蘭花搗爛，然后加入上述重量份數的乙醇和無菌水，于30～50KHz頻率下超聲20～25min，超聲溫度控制在30～35℃，然后過濾除去濾渣，取濾液離心處理，再取上層清液，即制得所述羽衣草浸提液；

S2、外植體培養：將S1中處理后的外植體接種到MS外植體培養基中，在溫度為25～28℃、光照強度為800～1000lux、光照時間為8～10h/天的條件下培養20～25天，外植體發芽后得到無菌試管苗；

其中，所述MS外植體培養基含有MS、0.3～0.6mg/L的細胞分裂素、0.3～0.5mg/L的L-硒甲基硒代半胱氨酸、0.1～0.2mg/L維生素C、0.2～0.3mg/L牛磺酸、38g/L蔗糖以及5.6g/L的瓊脂，pH值控制在5.6～6.0；

S3、繁殖培養：將S2中得到的無菌試管苗剪切后置于MS繁殖培養基中，在溫度為22～28℃、光照強度為1000～1200lux、光照時間為9～11h/天的條件下培養25～30天得到試管苗叢生芽；

其中，所述MS繁殖培養基中含有MS、0.4～0.8mg/L的細胞分裂素、0.4～0.6mg/L的L-硒甲基硒代半胱氨酸、0.2～0.3mg/L維生素C、0.3～0.4mg/L牛磺酸、35g/L蔗糖和5.8g/L的瓊脂，pH值控制在5.6～6.0；