[發明專利]一種腫瘤試劑盒

在審

• 申請號: 201710647826.0
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號: CN107462706A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發明（設計）人: 鄧鑫
• 申請（專利權）人: 廣西中醫藥大學附屬瑞康醫院（廣西中西醫結合醫院）
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/577
• 代理公司: 北京天盾知識產權代理有限公司11421
• 代理人: 易曉鈺

1.一種腫瘤試劑盒，其特征在于，包括腫瘤蛋白P185單克隆抗體、酶標板、陽性對照品、陰性對照品、洗滌液、終止液、鈣網蛋白(CRT)的特異性抗體、辣根過氧化物酶-鏈親和素及其顯色底物，所述的腫瘤蛋白P185單克隆抗體包括包被在酶標板上的腫瘤蛋白P185單克隆抗體和生物素標記的腫瘤蛋白P185單克隆抗體。

2.根據權利要求1所述的腫瘤試劑盒，其特征在于，所述特異性抗體為通過以鈣網蛋白為免疫原得到的單克隆抗體和/或多克隆抗體。

3.根據權利要求1所述的腫瘤試劑盒，其特征在于，所述的包被在酶標板上的腫瘤蛋白P185單克隆抗體為腫瘤蛋白P185單克隆抗體2D11，所述的生物素標記的腫瘤蛋白P185單克隆抗體為腫瘤蛋白P185單克隆抗體3F9，腫瘤蛋白P185單克隆抗體2D11、3F9的制備步驟如下：a)以NIH/3T3細胞i.p免疫第一批6～8周的Balb/C雌鼠，得到雌鼠的抗NIH/3T3血清；b)收集長至匯合的T6-17細胞，用PBS緩沖液洗1次，將上述制備的抗NIH/3T3抗血清用PBS緩沖液以1:200稀釋，然后取1ml加入T6-17細胞中，在8℃條件下溫育過夜，期間晃動盛放T6-17細胞的試管5～6次，然后再用PBS緩沖液洗1次，得到懸浮于PBS緩沖液中的T6-17細胞；c)用上述懸浮于PBS緩沖液中的T6-17細胞i.p免疫第二批6-8周的BaLb/C雌鼠，然后取雌鼠的脾細胞制成細胞懸液；d)用ELISA法從上述細胞懸液中篩選出分泌腫瘤蛋白P185單克隆抗體的雜交瘤細胞，并對雜交瘤細胞進行克隆化，從而得到兩株具有穩定分泌腫瘤蛋白P185單克隆抗體能力的雜交瘤細胞株，分別命名為雜交瘤細胞株2D11、雜交瘤細胞株3F9；e)將雜交瘤細胞株2D11、3F9分別注入不同的雌鼠體內，收集腹水，將腹水中的抗體純化，即得腫瘤蛋白P185單克隆抗體2D11、3F9。

4.根據權利要求1所述的腫瘤試劑盒，其特征在于，所述的洗滌液是由10g的Na2HPO4·12H2O、50g的NaCl、5g的NaH2PO4·2H2O加入純化水溶解定容至5000ml所得。