[發明專利]一種皮膚干細胞活性素的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201710643815.5
• 申請日: 2017-07-31
• 公開（公告）號: CN107397710B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 車七石;劉少輝
• 申請（專利權）人: 廣州潤虹醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: A61K8/98
• 分類號: A61K8/98;A61K8/362;A61K8/64;A61K8/66;A61K8/73;A61K8/92;A61K8/99;A61Q19/08;C12N5/0775
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 徐翔

1.皮膚干細胞活性素在霜劑化妝品中的用途，其特征在于，皮膚干細胞活性素的制備方法，包括以下步驟：

S1、胎盤間充質干細胞的分離：取臨床正常剖宮產的新鮮胎盤組織，無菌條件下分離胎盤中部內層組織剪成1cm×1cm×1cm的大小，用400-600u/ml的青霉素浸泡10-30min，用4℃D-Hank’s液沖洗3遍，用胰蛋白酶0.1-0.2g/mL和膠原蛋白酶0.05-0.08g/mL于37℃下消化30-60min，200目過濾網過濾收集組織細胞，紅細胞裂解液4℃水浴3-5min去除紅細胞即得；

S2、胎盤間充質干細胞的接種培養與誘導分化：將步驟S1得到的胎盤間充質干細胞接種在皮膚干細胞培養基中，于37℃、5％CO₂、培養箱中孵育15-25h，棄去培養基，重新加入新鮮的皮膚干細胞培養基中，待皮膚干細胞接近80-90％融合時，進行傳代擴增培養；

S3、皮膚干細胞活性素的制備：將步驟S2中接種在皮膚干細胞培養基中的胎盤間充質干細胞擴增5-10代，收集培養上清液，將上清液用0.22μm的無菌過濾器過濾，合并濾液即得；

步驟S1所述的皮膚干細胞培養基包括以下組分及其濃度：所述的皮膚干細胞培養基包括以下組分及其濃度：基礎培養基13.5mL、胰島素20mg/L、L-谷氨酰胺5mg/L、表皮生長因子8μg/L、成纖維細胞生長因子2μg/L、神經生長因子0.88μg/L、糖皮質激素175μg/L、檸檬酸鐵銨1mg/L、硝酸鐵0.5mg/L、EDTA-2Na6mg/L、蝦青素5mg/L、黃芩甙元0.1mg/L、飛燕草素35μg/L和桑色素3ng/L；

所述的基礎培養基為DMEM/F12培養基；

所述的霜劑化妝品包括以下組分及其質量百分比：

皮膚干細胞活性素10-15％、羊毛醇2-5％、白蜂蠟5-10％、銀耳多糖0.2-0.4％、SOD4-6％、肌肽2-4％、殼寡糖1-3％、L-蘋果酸2-5％、蜂膠2-4％和水47.6-71.8％。

2.根據權利要求1所述的皮膚干細胞活性素在霜劑化妝品中的用途，其特征在于，所述的霜劑化妝品由以下組分及其質量百分比組成：

皮膚干細胞活性素12.5％、羊毛醇3.5％、白蜂蠟7.5％、銀耳多糖0.3％、SOD5％、肌肽3％、殼寡糖2％、L-蘋果酸3.5％、蜂膠3％和水59.7％。