[發明專利]一種生產無巖藻糖基化蛋白的基因工程細胞系及其建立方法有效
| 申請號： | 201710641279.5 | 申請日： | 2017-07-31 |
| 公開（公告）號： | CN107217042B | 公開（公告）日： | 2020-03-06 |
| 發明（設計）人： | 魏化偉;黃亞杰 | 申請（專利權）人： | 江蘇東抗生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12P21/00;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736 | 代理人： | 李紅偉;高倩倩 |
| 地址： | 226400 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生產 無巖藻糖基化 蛋白 基因工程 細胞系 及其 建立 方法 | ||
1.一種生產無巖藻糖基化蛋白的基因工程細胞系，其特征在于，所述基因工程細胞系是Slc35c1基因沉默和 Fut8基因沉默的細胞系，所述細胞系選自：人、猴子、猿、倉鼠、大鼠、小鼠細胞。
2.根據權利要求1所述的基因工程細胞系，其特征在于，所述蛋白是含有Fc區的蛋白。
3.根據權利要求2所述的基因工程細胞系，其特征在于，所述基因工程細胞系中含有編碼含有Fc區的蛋白的核苷酸序列。
4.根據權利要求1所述的基因工程細胞系，所述基因工程細胞系含有Cas9基因序列。
5.根據權利要求1所述的基因工程細胞系，所述基因工程細胞系含有針對Slc35c1基因的sgRNA的基因序列和針對Fut8基因的sgRNA的基因序列。
6.權利要求1-5中任一項所述的基因工程細胞系的建立方法，其特征在于，所述建立方法包括如下步驟：敲除細胞中的Slc35c1基和Fut8基因，獲得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的細胞系。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述建立方法包括如下步驟：利用CRISPR/Cas9技術敲除細胞中的Slc35c1基因和Fut8基因，獲得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的細胞系。
8.一種制備無巖藻糖基化蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括利用權利要求1-5中任一項所述的基因工程細胞系。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：
（1）根據權利要求6或7所述的建立方法獲得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的基因工程細胞系；
（2）將蛋白的編碼序列導入步驟（1）獲得的基因工程細胞系中。
10.權利要求1-5中任一項所述的基因工程細胞系在制備無巖藻糖基化的蛋白中的應用。
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