[發明專利]五味子活性提取物的制備方法

在審

• 申請號: 201710626190.1
• 申請日: 2017-07-27
• 公開（公告）號: CN107468803A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 陳雨詩
• 申請（專利權）人: 磐安縣派普特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/79
• 分類號: A61K36/79;A61K36/57
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發明涉及植物活性物質提取領域，具體是五味子活性提取物的制備方法。

背景技術

五味子，始載于《神農本草經》，列為上品，為木蘭科植物五味子的干燥成熟果實，具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心等功效，主產于遼寧、黑龍江、吉林等地。研究表明五味子主要含有木脂素類成分，具有保肝降酶、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血壓以及調節免疫等作用，用于治療消化系統、心血管系統、中樞神經系統、生殖系統以及泌尿系統等疾病。鑒于其確切的藥理作用，五味子被廣泛應用于中醫臨床方劑和中藥制劑中。因此，研究五味子木脂素類成分提取工藝可為有效利用其資源提供科學依據。目前雖有多篇文獻報道了五味子木脂素的提取工藝，但有的采用有機溶劑進行提取，不適合工業化生產；有的提取方法不可靠，提取物中木脂素類成分含有量和轉移率較低，造成資源浪費，并影響臨床使用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種五味子活性提取物的制備方法，采用廉價的乙醇溶液進行提取，適合工業化生產，提取物中木脂素類成分含有量和轉移率高，五味子木脂素的提取率高，并且最后能分別得到五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素，產品質量高。

本發明針對背景技術中提到的問題，采取的技術方案為：五味子活性提取物的制備方法，包括回流提取、濃縮水沉、吸附、洗脫和干燥。回流提取步驟為在五味子粉末中加入6~9倍體積的85~95%乙醇回流提取1~4次，每次回流提取時間為100~150min。采用廉價的乙醇溶液對五味子活性物質進行提取，可減少生產成本，適合工業化生產；本發明生產工藝簡單，每一步操作均有準確數據，重現性好，產品質量穩定；乙醇低毒，提取得到的五味子活性物質的安全性高，綠色安全。

作為優選，濃縮水沉步驟為在8~15℃，1~3KPa條件下濃縮4~8h，加入五味子粉末體積3~6倍的純水，在0~4℃常壓下靜置3~6h進行水沉，第一次高速離心。低溫條件下濃縮，保護五味子木質素的活性。五味子木脂素為脂溶性物質，根據相似相容性質，隨著純水的加入，五味子木脂素在液體中的溶解度快速下降，以晶體形式析出；同時水沉法可去除大部分乙醇提取的五味子活性物質中的色素、維生素和有機酸等水溶性成份，達到純化五味子木脂素的目的。

作為優選，吸附步驟為在濃縮水沉步驟得到的上清液中加入五味子粉末重量的15~25%，攪拌吸附0.5~3h，第二次高速離心取活性炭，向活性炭中加入85~95%的乙醇，加入量為五味子粉末重量的8~15倍，溶液加熱至50~80℃，攪拌洗脫1~3h，第三次高速離心取上清液。先利用活性炭對上清液中的五味子木脂素進行特異性吸附，起到富集的作用，再利用高濃度乙醇溶液進行洗脫，對五味子木脂素進行回收，從而提高五味子木脂素的提取率。

作為優選，洗脫步驟包括合并第一離心得到的沉淀和第三次離心得到的上清液，低溫真空濃縮后上樣于大孔吸附樹脂柱，加20~30％乙醇水溶液洗脫3~5個柱體積，加75~85％乙醇水溶液洗脫6~10個柱體積，合并含有五味子木脂素的流分，減壓回收溶劑至干，加入1~4倍體積的正己烷溶解，放置1~3d，第一次抽濾，取固體；濾余液為五味子木脂素結晶母液，在濾余液中加入15~30wt%活性短肽，靜置0.4~0.8h，第二次抽濾，得到的固體與第一次抽濾得到的固體合并，為五味子木脂素粗品；所述大孔吸附樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。在低濃度乙醇溶液中AB-8型大孔吸附樹脂對五味子木脂素的吸附率高，可洗脫去除剩余的五味子油和揮發油；在高濃度乙醇溶液中AB-8型大孔吸附樹脂選擇性地吸附水溶性雜質而不吸附五味子木脂素，成功地將五味子木脂素純化。AB-8型大孔吸附樹脂洗脫過程中，五味子木脂素轉移率達99％以上，得到的五味子木脂素純度達90％以上。

作為優選，活性短肽的氨基酸序列為QSGFCTSYCYCLSKFNLTICYCLHCSS。上述活性短肽可明顯提高五味子木脂素的極性，相似相容，五味子木脂素在正己烷中的溶解度大幅下降，從而達到對濾余液中的五味子木脂素進行富集回收的目的。同時，活性短肽與五味子木脂素之間通過范德華力或氫鍵緊密結合，活性短肽將五味子木脂素進行包裹，保護其活性，因此，不必再加入輔料，降低成本。