[發明專利]一種用于檢測芝麻過敏原2Salbumin基因的LAMP引物組合物及其試劑盒

在審

• 申請號: 201710616118.0
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN107299142A
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發明（設計）人: 袁旦;陳沁;方雪恩;孔繼烈
• 申請（專利權）人: 上海速創診斷產品有限公司;復旦大學;上海大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 竺路玲

1.一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的LAMP引物組合物，其特征在于，包括如SEQ ID NO：1所示序列的正向外引物F3，如SEQ ID NO：2所示序列的反向外引物B3，如SEQ ID NO：3所示序列的正向內引物FIP以及如SEQ ID NO：4所示序列的反向內引物BIP。

2.一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，包括如權利要求1所述的LAMP引物組合物。

3.根據權利要求2所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，還包括LAMP工作液、熒光指示劑和Bst DNA聚合酶。

4.根據權利要求2所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，所述LAMP工作液包括Tris-HCl、KCl、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄和Tween-20。

5.根據權利要求3所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，所述熒光指示劑選自SYBR Green、Ever Green、Pico Green、SYTO系列中的至少一種。

6.根據權利要求2所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，還包括顯色劑。

7.根據權利要求6所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，所述顯色劑選自HNB、Calcein、甲酚紅、酚紅、間甲酚紫、溴甲酚紫、中性紅、萘酚酞和百里酚藍中的一種。

8.根據權利要求2所述的一種用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的試劑盒，其特征在于，還包括陽性對照和陰性對照，所述陽性對照為含有芝麻過敏原基因的樣品稀釋液，所述陰性對照為不含芝麻過敏原基因的去離子水。

9.一種非診斷和治療目的的用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1)采用CTAB法提取純化待測樣品的DNA；

步驟2)用如權利要求1所述的LAMP引物組合物進行環介導等溫擴增反應；

步驟3)結果判斷：根據是否出現“S”型擴增曲線判斷擴增結果，和/或根據反應體系是否出現顏色變化判斷擴增結果。

10.根據權利要求9所述的用于檢測芝麻過敏原2S albumin基因的方法，其特征在于，所述環介導等溫擴增反應的反應條件是：60～65℃，45～90min。