[發明專利]一種活細胞中Cr3+

有效

• 申請號: 201710615551.2
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN109307661B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發明（設計）人: 曾晞;方浚安;阮琴;牟蘭
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/38
• 代理公司: 貴州聯德佳為知識產權代理事務所(普通合伙) 52123
• 代理人: 張梅

本發明公開一種活細胞中Crsupgt;3+/supgt;、Alsupgt;3+/supgt;、Znsupgt;2+/supgt;的熒光成像方法，以化合物N,N’,N”?三[4?(苯并噻唑?2?基)?2,5?二羥基苯甲醛]縮?(3?氨乙基)胺作為活細胞內微量金屬離子Crsupgt;3+/supgt;、Alsupgt;3+/supgt;、Znsupgt;2+/supgt;的熒光成像探針，探針與活細胞相容，滲透到細胞內，通過探針分別對細胞內Crsupgt;3+/supgt;、Alsupgt;3+/supgt;、或Znsupgt;2+/supgt;染色后，用熒光倒置顯微鏡檢測熒光細胞圖像。本發明所述探針能實現對活細胞內Crsupgt;3+/supgt;、Alsupgt;3+/supgt;、Znsupgt;2+/supgt;三種離子的單通道、雙通道成像檢測，檢測效率高，檢測成本低。

技術領域

本發明涉及一種活細胞中離子的熒光成像方法，特別是一種活細胞中Cr³⁺、Al³⁺或Zn²⁺的熒光成像方法。

背景技術

熒光成像分析是目前廣泛應用于活細胞分析的一種高靈敏的可視化分析技術。隨著生命科學的發展，對細胞內的活性物種、細胞信號傳導及細胞凋亡等方面的信息研究越來越深入。熒光標記活細胞成像技術作為一種強有力的研究手段越來越多的用于生命科學領域，以解釋活細胞中的多種生命和生理現象，促進神經科學和干細胞研究，為理解癌癥和其他疾病的分子原因和生物力學的突破進展帶來希望。目前用于活細胞成像分析的熒光探針多為有機小分子熒光染料，這些有機熒光染料分子大多克服了壽命短、容易猝滅、生物相容性及穩定性差的缺點，能夠實現可視化、高選擇、實時、動態連續測定。

一些重金屬和過渡金屬元素因參與細胞生長發育、基因轉錄、神經傳遞等過程而具有非常重要的生理作用和功能，但當含量超過其相應的閾值時，它們對生物體的生長發育、生理代謝甚至于形態結構等會造成明顯損傷。因此要研究特定離子對生物體的影響，非常必要的方法之一就是利用熒光探針對活細胞內離子的熒光成像檢測。

能夠作為細胞成像的有機小分子探針，因其分子結構簡單，合成相對容易，檢測成本低廉，光譜性能優越，對細胞低毒性低，良好的細胞膜滲透性而備受關注。利用熒光探針技術檢測活細胞中微量金屬離子的相關報道已有不少，但能夠利用一種探針同時實現對活細胞內Cr³⁺、Al³⁺、Zn²⁺三種離子的單通道、雙通道成像檢測未見報道。

因此，現有技術中，存在不能同時實現對活細胞內Cr³⁺、Al³⁺、Zn²⁺三種離子的單通道、雙通道成像檢測的問題，檢測效率低，檢測成本高。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種活細胞中Cr³⁺、Al³⁺和/或Zn²⁺的熒光成像方法，本發明所述探針能實現對活細胞內Cr³⁺、Al³⁺、Zn²⁺三種離子的單通道、雙通道成像檢測，檢測效率高，檢測成本低。

本發明的技術方案：一種活細胞中Cr³⁺、Al³⁺或Zn²⁺的熒光成像方法，以化合物N,N’,N”-三[4-(苯并噻唑-2-基)-2,5-二羥基苯甲醛]縮-(3-氨乙基)胺作為活細胞內微量金屬離子Cr³⁺、Al³⁺或Zn²⁺的熒光成像探針，探針與活細胞相容，滲透到細胞內，通過探針分別對細胞內Cr³⁺、Al³⁺或Zn²⁺染色后，用熒光倒置顯微鏡檢測熒光細胞圖像；所述的探針的化學結構式為：