[發(fā)明專利]一種鐵皮石斛內(nèi)生真菌菌株及其產(chǎn)生的胞外多糖以及該胞外多糖的提取方法與應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710614605.3 | 申請(qǐng)日： | 2017-07-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN107904177B | 公開(kāi)（公告）日： | 2020-12-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 婁文勇;曾英杰;王洪峰;宗敏華;梁靜 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 華南理工大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/14 | 分類號(hào)： | C12N1/14;C12P19/04;C08B37/00;A01P1/00;A61P31/04;C12R1/77 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102 | 代理人： | 何淑珍 |
| 地址： | 510640 廣*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 鐵皮 石斛 真菌 菌株 及其 產(chǎn)生 多糖 以及 提取 方法 應(yīng)用 | ||
1.一株鐵皮石斛內(nèi)生真菌菌株，其特征在于，所述菌株為甘蔗鐮刀霉菌（
2.一種由權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛內(nèi)生真菌菌株產(chǎn)生的胞外多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）將所述鐵皮石斛內(nèi)生真菌菌株活化培養(yǎng)后，進(jìn)行種子液培養(yǎng)，再將得到的種子液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；所述活化培養(yǎng)是采用試管斜面培養(yǎng)方法，于28±1℃條件下培養(yǎng)48~72小時(shí)；
其中，所述活化培養(yǎng)基限定為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基；所述種子液培養(yǎng)是限定為馬鈴薯葡萄糖水培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為：28±1℃、120 rpm和48~72小時(shí)；所述發(fā)酵培養(yǎng)是指按體積比為5%～15%的接種量將種子液接種于馬鈴薯葡萄糖水培養(yǎng)基中，于28±1℃、120 rpm搖床發(fā)酵培養(yǎng)7~14天，其中發(fā)酵培養(yǎng)基限定為馬鈴薯葡萄糖水培養(yǎng)基；
（2）將步驟（1）發(fā)酵培養(yǎng)后得到的發(fā)酵液采用布氏漏斗真空抽濾，收集抽濾液進(jìn)行真空濃縮、醇沉、離心，將離心得到的沉淀脫水、干燥后，溶于去離子水中進(jìn)行透析，對(duì)透析液進(jìn)行真空冷凍干燥，凍干粉即為所述鐵皮石斛內(nèi)生真菌胞外多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述真空濃縮是采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于45℃將抽濾液濃縮為原液的1/10體積。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述醇沉的具體操作為采用濃縮液：95%乙醇=1:4的體積比震蕩混合均勻，于4℃靜置12~24小時(shí)；所述95%是指體積百分比。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述離心指在8000 rpm離心15分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述脫水處理是依次采用無(wú)水乙醇、丙酮和石油醚洗滌進(jìn)行脫水處理；所述干燥是在溫度50~55℃下進(jìn)行干燥。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，將離心得到的沉淀脫水、干燥后，以0.05~0.2g/mL的濃度溶于去離子中進(jìn)行透析；所述透析是采用截留分子量3500Da透析袋蒸餾水透析24~72小時(shí)。
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