[發明專利]一種鐵皮石斛內生真菌菌株及其產生的胞外多糖以及該胞外多糖的提取方法與應用

有效

• 申請號: 201710614605.3
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN107904177B
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發明（設計）人: 婁文勇;曾英杰;王洪峰;宗敏華;梁靜
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/04;C08B37/00;A01P1/00;A61P31/04;C12R1/77
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

1.一株鐵皮石斛內生真菌菌株，其特征在于，所述菌株為甘蔗鐮刀霉菌（Fusarium solani ） SCUT951，其于2017年6月2日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCCNO.M2017299。

2.一種由權利要求1所述的鐵皮石斛內生真菌菌株產生的胞外多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將所述鐵皮石斛內生真菌菌株活化培養后，進行種子液培養，再將得到的種子液進行發酵培養；所述活化培養是采用試管斜面培養方法，于28±1℃條件下培養48~72小時；

其中，所述活化培養基限定為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基；所述種子液培養是限定為馬鈴薯葡萄糖水培養基，培養條件為：28±1℃、120 rpm和48~72小時；所述發酵培養是指按體積比為5%～15%的接種量將種子液接種于馬鈴薯葡萄糖水培養基中，于28±1℃、120 rpm搖床發酵培養7~14天，其中發酵培養基限定為馬鈴薯葡萄糖水培養基；

（2）將步驟（1）發酵培養后得到的發酵液采用布氏漏斗真空抽濾，收集抽濾液進行真空濃縮、醇沉、離心，將離心得到的沉淀脫水、干燥后，溶于去離子水中進行透析，對透析液進行真空冷凍干燥，凍干粉即為所述鐵皮石斛內生真菌胞外多糖。

3.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述真空濃縮是采用旋轉蒸發儀于45℃將抽濾液濃縮為原液的1/10體積。

4.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述醇沉的具體操作為采用濃縮液：95%乙醇=1:4的體積比震蕩混合均勻，于4℃靜置12~24小時；所述95%是指體積百分比。

5.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述離心指在8000 rpm離心15分鐘。

6.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，所述脫水處理是依次采用無水乙醇、丙酮和石油醚洗滌進行脫水處理；所述干燥是在溫度50~55℃下進行干燥。

7.根據權利要求2所述的提取方法，其特征在于，步驟（2）中，將離心得到的沉淀脫水、干燥后，以0.05~0.2g/mL的濃度溶于去離子中進行透析；所述透析是采用截留分子量3500Da透析袋蒸餾水透析24~72小時。