[發明專利]一種用于合成瑞林類藥物的二肽

有效

• 申請號: 201710614580.7
• 申請日: 2017-07-25
• 公開（公告）號: CN109293736B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 田振平;韓榮剛;薛琛琛;彭海濤;匡德琦
• 申請（專利權）人: 齊魯制藥有限公司
• 主分類號: C07K5/078
• 分類號: C07K5/078;C07K7/23;C07K1/06;C07K1/04
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1.一種固相合成法制備瑞林類藥物的方法，其特征在于，所述固相合成法制備瑞林類藥物包括如下步驟：

（1）以固相樹脂為原料，在縮合劑、活化助劑作用下采用固相偶聯的方式依次連接Fmoc保護的氨基酸，重復循環直至合成得到側鏈保護的瑞林類藥物肽-樹脂或瑞林類藥物部分片段肽-樹脂；再一次偶聯二肽片段H-Pyr-His(R)-OH，接入[1-2]肽的焦谷氨酸和組氨酸，得到側鏈保護的瑞林類藥物肽-樹脂或瑞林類藥物部分片段肽-樹脂，其結構為：H-Pyr-His(R)-Trp(R₁)-Ser(R₂)-Tyr(R₃)-X-Leu-Arg(R₄)-Pro-Y-樹脂，

R₁?選自Boc或H；R₂選自tBu或Trt；R₃選自tBu、Bzl或H；R₄選自Pbf或H；

不同的瑞林類藥物X、Y代表不同的結構，曲普瑞林中X為D-Trp，Y為Gly；戈舍瑞林中X為D-Ser，Y為NH₂-NH-CO-NH₂；布舍瑞林中X為D-Ser(tBu)，Y為NHEt；

（2）瑞林類藥物肽-樹脂或瑞林類藥物部分片段肽-樹脂經酸解劑裂解除去樹脂和保護基團，得到瑞林類藥物或瑞林類藥物部分片段；

其中，步驟（1）中所述的Fmoc保護的氨基酸，選自：

Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(Trt)-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Trp-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、?Fmoc-Arg-OH，所述的各種氨基酸的用量為與樹脂的用量的摩爾比為2～5:1；

步驟（1）中所述的二肽片段H-Pyr-His(R)-OH，具有式I所示的結構：

式I

R為側鏈保護基團，選自Fmoc、Boc、Trt?。

2.根據權利要求1的方法，其特征在于：當所述步驟（1）的固相樹脂含保護基時，應加入脫保護劑脫除樹脂上的保護基。

3.根據權利要求1或2的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述的脫保護劑選自哌啶；脫保護反應時間為20～60min；所述的固相樹脂選自Rink?Amide樹脂、Rink?Amide?MBHA樹脂、Sieber?Amide樹脂、Rink?Amide?AM樹脂、2-CTC樹脂，荷載量為0.3～1.5mmol/g；所述的固相偶聯反應時間為30～150min。

4.根據權利要求3的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述脫保護反應時間為30～40min；所述的固相樹脂荷載量為0.3～0.8mmol/g；所述的固相偶聯反應時間為60～120?min。

5.根據權利要求1或2的方法，其特征在于：步驟（2）中，所述的酸解劑選自三氟乙酸（TFA）、三異丙基硅烷（TIS）、1,2-乙二硫醇（EDT）、水組成的混合物，其中三氟乙酸：三異丙基硅烷：1,2-乙二硫醇：水體積比為90~95：1~5：2~5：2~5；或三氟乙酸（TFA）、二氯甲烷組成的混合物，其中三氟乙酸：二氯甲烷體積比為0.5~2.5：97.5~99.5；所述的酸解劑的用量與肽-樹脂之比為5～20ml/g；所述的裂解反應時間為1～5小時。

6.根據權利要求5的方法，其特征在于：步驟（2）中，所述的酸解劑的用量與肽-樹脂之比為8～15ml/g；所述的裂解反應時間為1.5～3.5h。

7.根據權利要求6的方法，其特征在于：步驟（2）中，所述的酸解劑的用量與肽-樹脂之比為10ml/g。

8.根據權利要求1或2的方法，其特征在于：所述固相合成法制備瑞林類藥物還包括：將得到的瑞林類藥物粗品經反相高效液相色譜純化、凍干得到瑞林類藥物的純化步驟。