[發(fā)明專利]一種銥聯(lián)吡啶配合物及合成方法以及在DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710606253.7
• 申請(qǐng)日: 2017-07-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107573384B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳填烽;田一喬;杜碧瑩;黃妍瑜;高盼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué);廣州市藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): C07F15/00
• 分類號(hào): C07F15/00;A61K31/555;A61K47/54;A61K9/14;A61K47/26;A61K51/04;A61K51/12;A61K49/00;A61P35/00;C09K11/06;A61K103/00
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運(yùn)貞;劉瑜

1.銥聯(lián)吡啶配合物在制備腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其特征在于，所述銥聯(lián)吡啶配合物的結(jié)構(gòu)式如式I所示：

所述的腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)通過(guò)如下方法制備得到：

(a)將靶向分子修飾的四條寡核苷酸鏈溶解在1×TAE/Mg²⁺緩沖液中，2分鐘內(nèi)加熱至95℃，逐漸冷卻至2～8℃，得到靶向分子修飾的正四面體DNA納米粒子；

(b)將銥聯(lián)吡啶配合物溶液與步驟(a)中得到的靶向分子修飾的正四面體DNA納米粒子共孵育1～72h，然后離心、棄上清，再將沉淀用1×TAE/Mg²⁺緩沖液重懸，得到腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)；

步驟(a)中所述的四條寡核苷酸鏈的序列如SEQ ID NO:1～4所示；

步驟(a)中所述的靶向分子為MUC-1粘蛋白適配體和AS1411核酸適配體中的一種以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銥聯(lián)吡啶配合物在制備腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其特征在于，所述的銥聯(lián)吡啶配合物通過(guò)如下方法制備得到：

(1)將4-甲基-[2,2’聯(lián)吡啶]-4-羧酸、NHS、EDC分散于DMF中，加熱至40～60℃進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓濃縮DMF溶液，加水，再用二氯甲烷萃取，收集有機(jī)層，干燥、抽濾、取濾液、旋干，得到產(chǎn)物1；其中，4-甲基-[2,2’聯(lián)吡啶]-4-羧酸、NHS和EDC按摩爾比為1：1～2：1～2進(jìn)行配比；

(2)將二碳酸二叔丁酯分散于甲醇中，在冰浴條件下滴加到己二胺的甲醇溶液中，常溫進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓旋干，取固體，加水溶解，然后用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯層，減壓濃縮，調(diào)pH至酸性，再用水萃取，收集水層，調(diào)pH至堿性，凍干，得產(chǎn)物2；其中，己二胺和二碳酸二叔丁酯按摩爾比為3～6：1進(jìn)行配比；

(3)將步驟(1)得到的產(chǎn)物1、步驟(2)得到的產(chǎn)物2、DMAP、三乙胺加入DCM中，常溫下反應(yīng)12～24h，反應(yīng)結(jié)束后，洗滌，收集有機(jī)層，干燥，抽濾，取濾液，旋干，得到產(chǎn)物3；其中產(chǎn)物1、產(chǎn)物2、DMAP、三乙胺按摩爾比為1：1.1～1.5：0.5～1.0：5～13進(jìn)行配比；

(4)將步驟(3)得到的產(chǎn)物3溶于DCM，冰浴下滴加DCM稀釋的三氟乙酸，常溫下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，旋干溶劑，得到產(chǎn)物4；其中，產(chǎn)物3與三氟乙酸按摩爾比為1：5～10進(jìn)行配比；

(5)將IrCl₃和2-(2-噻吩)-吡啶分散于混合溶劑中，加熱至110～135℃進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，抽濾、洗滌、取濾餅、干燥，得到產(chǎn)物5(氯橋連中間體)；其中，混合溶劑為乙二醇乙醚和水按體積比1～3：1配比得到的混合溶劑，IrCl₃與2-(2-噻吩)-吡啶按摩爾比為1：2進(jìn)行配比；

(6)將步驟(5)得到的產(chǎn)物5和步驟(4)得到的產(chǎn)物4加入到混合溶劑中，加熱至40～55℃進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后再加入六氟磷酸銨，常溫下攪拌，抽濾，取濾液，旋干，得到銥聯(lián)吡啶配合物；其中，混合溶劑為二氯甲烷和甲醇按體積比1：1～3配比得到的混合溶劑，產(chǎn)物4和產(chǎn)物5按摩爾比為2.1～2.6：1進(jìn)行配比。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的銥聯(lián)吡啶配合物在制備腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其特征在于：

步驟(2)中所述的調(diào)pH至酸性為采用稀鹽酸溶液調(diào)至pH＝4；

步驟(2)中所述的調(diào)pH至堿性為采用氫氧化鈉溶液調(diào)至pH＝9；

步驟(3)中所述的洗滌為采用稀鹽酸水溶液進(jìn)行洗滌。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的銥聯(lián)吡啶配合物在制備腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其特征在于：

步驟(2)中所述的滴加時(shí)間為0.5～1.0h；

步驟(2)中所述的反應(yīng)時(shí)間為6～12h；

步驟(4)中所述的反應(yīng)的時(shí)間為4～8h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的銥聯(lián)吡啶配合物在制備腫瘤血管生成擬態(tài)靶向性DNA納米載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其特征在于：所述的腫瘤為人非小細(xì)胞肺癌、人宮頸癌、人胃癌、黑色素瘤、人成骨肉瘤、乳腺癌或腦膠質(zhì)瘤。