[發(fā)明專利]一種用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710606252.2
• 申請(qǐng)日: 2017-07-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107400678A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹東;胡開(kāi)順;李瑜;嚴(yán)海燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N15/85
• 分類號(hào): C12N15/85;C12N15/62
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司44245
• 代理人: 崔紅麗,裘暉

1.一種用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的克隆載體是含有IRDR-L-IRDR-R盒的雙鏈環(huán)狀質(zhì)粒，所述IRDR-L-IRDR-R盒包括IRDR-L序列、啟動(dòng)子、SFB純化標(biāo)簽序列、attR1序列、反向選擇性標(biāo)記基因序列、attR2序列、篩選基因序列和IRDR-R序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的IRDR-L序列為SEQ ID NO：1中自5′端第9102位～9328位堿基的反向互補(bǔ)序列；

所述的IRDR-R序列為SEQ ID NO：1中自5′端第5956位～6183位堿基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的啟動(dòng)子是CAG啟動(dòng)子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的SFB純化標(biāo)簽序列為SEQ ID NO：1中自5′端第1172位～1426位堿基。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的attR1序列為SEQ ID NO：1中自5′端第1436位～1560位堿基；

所述的attR2序列為SEQ ID NO：1中自5′端第3016位～3140位堿基的反向互補(bǔ)序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的反向選擇性標(biāo)記基因是指自殺基因ccdB。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的篩選基因包括抗性和熒光篩選基因。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于高效純化相互作用蛋白的克隆載體，其特征在于：

所述的抗性篩選基因是指嘌呤霉素抗性基因；

所述的熒光篩選基因是指綠色熒光蛋白基因。

9.一種克隆載體pSM1.1-SFB-GFP，其特征在于：所述的克隆載體pSM1.1-SFB-GFP的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

10.權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述的克隆載體或權(quán)利要求9所述的克隆載體pSM1.1-SFB-GFP在蛋白相互作用研究領(lǐng)域中的應(yīng)用。