[發(fā)明專利]一種抗繆勒氏管激素的近紅外熒光層析免疫定量檢測試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710602540.0 | 申請日: | 2017-07-21 |
| 公開(公告)號: | CN109283343A | 公開(公告)日: | 2019-01-29 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 丁曉輝 | 申請(專利權(quán))人: | 上海吉宣生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/74 | 分類號: | G01N33/74;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/533 |
| 代理公司: | 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 嚴(yán)晨;許亦琳 |
| 地址: | 201702 上海市青浦區(qū)*** | 國省代碼: | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 檢測線 包被 試劑盒 免疫定量檢測 硝酸纖維素膜 玻璃纖維素 單克隆抗體 近紅外熒光 熒光素標(biāo)記 試劑條 質(zhì)控線 雞IgY 層析 加樣 抗體 激素 生物技術(shù)領(lǐng)域 范圍上限 激素檢測 吸水墊片 線性區(qū)間 抗原 背板 墊片 羊抗 樣本 局限 | ||
1.一種抗繆勒氏管激素檢測試劑盒,包括位于背板上的試劑條,試劑條從加樣端開始依次為加樣墊片、玻璃纖維素片、硝酸纖維素膜和吸水墊片,所述玻璃纖維素片上包被有熒光素標(biāo)記的第一抗AMH單克隆抗體和熒光素標(biāo)記的雞IgY抗體,所述硝酸纖維素膜上設(shè)有T1檢測線、T2檢測線和質(zhì)控線,所述T1檢測線上包被有第二抗AMH單克隆抗體,所述T2檢測線上包被有AMH抗原,所述質(zhì)控線上包被有羊抗雞IgY抗體。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述熒光素為氟硼二吡咯熒光素(BODIPY)。
3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述第一抗AMH單克隆抗體為兔源性抗AMH單克隆抗體。
4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述第二抗AMH單克隆抗體為鼠源性抗AMH單克隆抗體。
5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述第一抗AMH單克隆抗體與第二抗AMH單克隆抗體為不同的抗體。
6.如權(quán)利要求1-5任一權(quán)利要求所述的抗繆勒氏管激素檢測試劑盒的制備方法,包括如下步驟:
1)用緩沖液制備熒光物溶液,將AMH單克隆抗體1和雞IgY抗體加入熒光物溶液中,制備獲得免疫熒光復(fù)合物溶液;
2)將步驟1)所得的免疫熒光復(fù)合物溶液噴點至玻璃纖維素片;
3)用緩沖液制備羊抗雞IgY溶液、AMH單克隆抗體2溶液和AMH抗原溶液;
4)使用羊抗雞IgY溶液、AMH單克隆抗體2溶液和AMH抗原溶液分別在硝酸纖維素膜上噴點C線、T1線和T2線;
5)貼膜、切踩即得所述抗繆勒氏管激素檢測試劑盒。
7.如權(quán)利要求6所述的制備方法,其特征在于,還包括如下技術(shù)特征中的一種或多種:
A1)所述步驟1)中,分別將AMH單克隆抗體1和雞IgY抗體加入兩份不同的熒光物溶液中,反應(yīng)完成后再將兩份溶液混合;
A2)所述步驟1)中,熒光物溶液中熒光物的濃度為1-20pmol/L;
A3)所述步驟1)中,按照抗體目標(biāo)終濃度為0.5-2mg/ml將抗體加入熒光物溶液;
A4)所述步驟1)中,抗體加入熒光物溶液后,室溫攪拌兩小時以上;
A5)所述步驟1)中,使用PBS緩沖液制備熒光物溶液,PBS緩沖液的pH=6.8-7.2,濃度為0.01-0.05M;
A6)所述步驟2)中,噴點時將溶液稀釋至OD720=2.0~4.0;
A7)所述步驟2)中,使用PBS緩沖液稀釋溶液,PBS緩沖液的pH=6.8-7.2,濃度為0.01-0.05M;
A8)所述步驟2)中,噴點量為2-5mg/ml;
A9)所述步驟2)中,噴點后35-45℃烘干。
8.如權(quán)利要求6所述的制備方法,其特征在于,還包括如下技術(shù)特征中的一種或多種:
B1)所述步驟3)中,使用IgY溶液的終濃度為1.0-2.0mg/ml;
B2)所述步驟3)中,AMH單克隆抗體2溶液的終濃度為1.0-2.0mg/ml;
B3)所述步驟3)中,AMH抗原溶液的終濃度為1.0-2.0mg/ml;
B4)所述步驟3)中,使用PBS緩沖液制備溶液,PBS緩沖液的pH=6.8-7.2,濃度為0.01-0.05M;
B5)所述步驟4)中,噴點量為1-3μl/cm;
B6)所述步驟4)中,噴點后35-45℃烘干。
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