[發明專利]一種用于測定D-二聚體含量的化學發光板的包被方法有效
| 申請號： | 201710602083.5 | 申請日： | 2017-07-21 |
| 公開（公告）號： | CN107247138B | 公開（公告）日： | 2019-01-29 |
| 發明（設計）人： | 王賢俊;何丹 | 申請（專利權）人： | 王賢俊 |
| 主分類號： | G01N33/531 | 分類號： | G01N33/531;G01N21/76 |
| 代理公司： | 溫州名創知識產權代理有限公司 33258 | 代理人： | 曾建芳 |
| 地址： | 325000 浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 測定 二聚體 含量 化學 光板 包被 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于測定D-二聚體含量的化學發光板的包被方法，其特征在于，包括以下步驟：①制備包被過程中的使用液，該使用液包括包被液、清洗液、復合酶液、偶聯液、保護液，所述包被液由15mM的pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液、2.5μg/mL的D-二聚體抗體、質量分數為0.05％的Brij-35、質量分數為1.5％的蔗糖、質量分數為2％的甘油、質量分數為0.03％的PC-300組成；所述2.5μg/mL的D-二聚體抗體制備過程如下：選取D-二聚體抗體，加入50微升復合酶液，酶切過程中溫度條件為37℃，時間為2h；所述清洗液由15mM的pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液、質量分數為0.03％的Tween-80組成；所述復合酶液是由胃蛋白酶和木瓜蛋白酶組成，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶的質量比例為0.5∶0.1；所述偶聯液采用2mM的N，N’-羰基二咪唑的醇溶液；所述保護液采用質量分數為60％的甘油-磷酸鹽緩沖液；
②選取材質為96孔白色不透明的聚苯乙烯微孔板，
③聚苯乙烯微孔板的每孔加入50微升的偶聯液，室溫條件下孵育30min，用清洗液清洗聚苯乙烯微孔板3次，每次5min；
④聚苯乙烯微孔板的每孔再加入100微升的包被液，偶聯過程中溫度條件為室溫，時間為1.5h，用清洗液清洗聚苯乙烯微孔板3次，每次5min；
⑤再在聚苯乙烯微孔板的每孔加入50微升的保護液，低溫，風干。
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