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[發(fā)明專利]檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的成套引物及其應(yīng)用有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201710590585.0 申請日: 2017-07-19
公開(公告)號: CN107619854B 公開(公告)日: 2020-05-22
發(fā)明(設(shè)計)人: 郜培杰;張福杰;史亞倫;王旭東;馬鵬飛 申請(專利權(quán))人: 北京安普生化科技有限公司;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院
主分類號: C12Q1/6883 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
代理公司: 北京勁創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11589 代理人: 王闖
地址: 100081 北京市*** 國省代碼: 北京;11
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 檢測 hiv 耐藥 突變 成套 引物 及其 應(yīng)用
【權(quán)利要求書】:

1.一種檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的成套引物,所述成套引物含有序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.5所示的核苷酸序列:

SEQ ID No.1:GAAATGATGACAGCATGTCAGGGAG;

SEQ ID No.2:GAAATGATGACAGCATGCCAGGGAG;

SEQ ID No.3:CAAACTCCCACTCAGGAATCCAGGT;

SEQ ID No.4:CAAACTCCCATTCAGGAATCCAGGT;

SEQ ID No.5:CAAATTCCCACTCAGGAATCCAGGT,其中:

所述成套引物用于擴(kuò)增HIV-1基因組的Pol基因蛋白酶和逆轉(zhuǎn)錄酶基因片段,所述基因片段包含蛋白酶基因區(qū)1-99位氨基酸的編碼子和逆轉(zhuǎn)錄酶基因區(qū)1-410位氨基酸的編碼子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的成套引物,其特征在于:

所述耐藥突變位點(diǎn)為位于HIV-1基因組的Pol基因的核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑相關(guān)位點(diǎn)、非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑相關(guān)位點(diǎn)和蛋白酶抑制劑相關(guān)位點(diǎn)。

3.一種檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,所述試劑盒包括權(quán)利要求1或2所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的成套引物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,其特征在于:

所述成套引物的量為:SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)與SEQ ID No.3所示的核苷酸序列的引物、SEQ ID No.4所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.5所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)為的比例為1:(1-2)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,其特征在于:所述成套引物的量為:SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)與SEQ ID No.3所示的核苷酸序列的引物、SEQ ID No.4所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.5所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)為的比例為1:(1.2-1.8)。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,其特征在于:所述成套引物的量為:SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)與SEQ ID No.3所示的核苷酸序列的引物、SEQ ID No.4所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.5所示的核苷酸序列的引物的總摩爾數(shù)為的比例為1:1.5。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,其特征在于:

所述SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的引物和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列的引物的摩爾數(shù)比為1:1;

SEQ ID No.3所示的核苷酸序列的引物、SEQ ID No.4所示的核苷酸序列的引物和SEQID No.5所示的核苷酸序列的引物的摩爾數(shù)比為1:1:1。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,其特征在于:

所述試劑盒中還含有RT-PCR擴(kuò)增試劑。

9.權(quán)利要求1或2所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的成套引物,或者權(quán)利要求3-8中任一項所述的檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的試劑盒,在制備檢測或者輔助檢測HIV-1耐藥突變位點(diǎn)的制劑中的應(yīng)用。

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