[發明專利]一種高產β-1,3-葡聚糖枯草芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201710590529.7
• 申請日: 2017-07-19
• 公開（公告）號: CN107267420B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 賈源賓;趙伯濤;葛洪;王志來;汪明新;徐軍;謝鑫;錢驊;黃曉德;朱羽堯;陳斌
• 申請（專利權）人: 南京曜動節能環保科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/08;C12R1/125
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 孫立冰

1.一種枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌株，其保藏號為：CGMCC No.12176。

2.權利要求1的枯草芽孢桿菌菌株，其16S rDNA序列如SEQ ID No：1所示。

3.一種制備β-1,3-葡聚糖的方法，包括將權利要求1的菌株發酵培養直接轉化蔗糖合成β-1,3-葡聚糖，包括下列步驟：

a.將權利要求1的菌株接種于菌種活化培養基，靜置恒溫培養；

b.從菌種活化培養基上刮取活化的菌株轉接到液體種子培養液培養，作為發酵培養的種子液；

c.將種子液接種到發酵培養液中，于發酵罐發酵，即得；

其中a步驟中，活化培養基中含KH₂PO₄ 0.3-1.0g/L、CaCl₂ 0.3-1.0g/L、MgSO₄ 0.6-1.2g/L、FeSO₄·7H₂O 0.6-1.2g/L、蔗糖3.0-8.0g/L和瓊脂12.0-18.0g/L，活化培養基pH6.5-7.0；恒溫培養溫度為25-30℃；培養時間2-3天。

4.權利要求3的方法，其中b步驟中，液體種子培養液中含蛋白胨8.0-10.0g/L、酵母浸粉3.0-5.0g/L和氯化鈉3.0-5.0g/L，液體種子培養液pH為7.0-7.8。

5.權利要求3的方法，其中b步驟中，在液體種子培養液中的培養溫度為28-32℃、搖床中以150-300rpm的速度震蕩培養48-72h，至培養液OD₆₀₀值在0.6-0.9之間時結束培養。

6.權利要求3的方法，其中c步驟中，發酵培養液中含蛋白胨0-3.0g/L、酵母浸粉0-1.5g/L和蔗糖120g/L，發酵培養液pH為7.0-7.8。

7.權利要求3的方法，其中c步驟中，種子液與發酵培養液的體積比為1:300～1:800。

8.權利要求3的方法，其中c步驟中，發酵罐發酵溫度為25-35℃，發酵時間為5-9天。