[發(fā)明專利]一種核酸適配體?熊果酸的偶聯(lián)物無載體自組裝納米粒及其制備和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710586279.X
• 申請(qǐng)日: 2017-07-18
• 公開（公告）號(hào): CN107349429A
• 公開（公告）日: 2017-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邵敬偉;郭燕;許愛笑
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/54
• 分類號(hào): A61K47/54;A61K31/56;A61K49/00;A61P35/04
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊,李翠娥

本發(fā)明屬于抗腫瘤轉(zhuǎn)移化合物領(lǐng)域，具體涉及一種核酸適配體?熊果酸的偶聯(lián)物無載體自組裝納米粒及其制備和應(yīng)用。本發(fā)明通過將抗癌活性藥物熊果酸與氨基化的適配體在水和DMSO所組成的共溶性體系中通過酰胺鍵偶聯(lián)，利用溶劑交換法制得無載體自組裝納米粒，得到治療腫瘤轉(zhuǎn)移的適配體和熊果酸偶聯(lián)靶向藥物，在腫瘤轉(zhuǎn)移方面的效果顯著性提升。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于抗腫瘤轉(zhuǎn)移化合物領(lǐng)域，具體涉及一種核酸適配體-熊果酸的偶聯(lián)物無載體自組裝納米粒及其制備和應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為，見于腫瘤發(fā)展的中后階段。腫瘤侵襲也稱為腫瘤直接擴(kuò)散(direct spread)。瘤細(xì)胞不連續(xù)性播散，并在遠(yuǎn)隔部位生長(zhǎng)的過程為轉(zhuǎn)移(metastasis)。上述過程是一個(gè)復(fù)雜的、多步驟的過程，大致包括腫瘤細(xì)胞從原發(fā)腫瘤灶脫離；降解基底膜，向外浸潤(rùn)、遷移并粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞；進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)隨著血流到達(dá)并停留于遠(yuǎn)處的血管壁；穿過血管侵入細(xì)胞外基質(zhì)，最后在特定的組織或器官形成轉(zhuǎn)移灶這樣一個(gè)過程。

腫瘤轉(zhuǎn)移過程牽涉到細(xì)胞脫落、浸潤(rùn)、遷移運(yùn)行、著床、新生血管生成等，理論上講，只要能夠阻止上述一個(gè)或多個(gè)過程，就能抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。目前抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物的研究也是針對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的各個(gè)環(huán)節(jié)，尋找具有不同藥理作用的受試物。研究較多的有抑制癌細(xì)胞粘附、抑制蛋白水解酶對(duì)基底膜降解、抑制癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、抑制腫瘤新生血管形成、抗血管內(nèi)凝聚以及抗信息傳遞的制劑等。

抗腫瘤和抗腫瘤轉(zhuǎn)移是腫瘤治療中不同的概念，抗腫瘤是指藥物能夠抑制腫瘤生長(zhǎng)并能夠起到腫瘤殺傷的作用，目前臨床上常見的藥物主要是一些放化療藥物，但是患者的存活率依然很低。抗腫瘤轉(zhuǎn)移是指在腫瘤轉(zhuǎn)移的過程，藥物能夠抑制腫瘤細(xì)胞的遷移、粘附或侵襲等步驟，起到抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的效果。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的的一種重要生物學(xué)表征，是導(dǎo)致癌癥患者死亡的首要因素。沒有發(fā)生轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤的治療預(yù)后很好；而發(fā)生轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞也大大增加了腫瘤復(fù)發(fā)的幾率，降低了病人的生存率。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在臨床上約有90％的癌癥患者死于腫瘤轉(zhuǎn)移(Gupta and Massague，2006；Hanahan and Weinberg，2011)。腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移是癌癥導(dǎo)致患者死亡的重要原因，而腫瘤的侵襲和遷移是腫瘤轉(zhuǎn)移的最重要的環(huán)節(jié)，抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，才能更好的預(yù)防患者的癌癥復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。然而目前上市藥物中，抗腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物種類較少。因此，腫瘤轉(zhuǎn)移是腫瘤臨床治療實(shí)踐中迫切需要解決的問題，也是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。

熊果酸是一種廣泛存在于天然植物中的一種三萜類化合物，大量的研究發(fā)現(xiàn)，該物質(zhì)具有抗癌、誘導(dǎo)癌細(xì)胞分化的作用，它不僅能夠有效抑制細(xì)胞增殖分化，誘導(dǎo)其凋亡，而且小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也表明熊果酸具有增強(qiáng)免疫的功能。雖然有研究表明熊果酸具有抗血管生成的作用，但是由于其在抗腫瘤轉(zhuǎn)移方面的效果不太理想，所以熊果酸在腫瘤轉(zhuǎn)移方面的研究較少。

核酸適配體(aptamer)是一類寡核苷酸片段，包括核糖核酸(RNA)和單鏈脫氧核糖核酸(ssDNA)，可與不同的靶標(biāo)分子高親和力特異性結(jié)合。它可作用于蛋白質(zhì)、金屬離子、小分子化合物、細(xì)胞膜表面受體等靶標(biāo)。較之抗體、多肽等較常見的靶向性配體，核酸適配體體積相對(duì)較小、免疫原性較低且易于體外篩選、性質(zhì)穩(wěn)定、易合成、易標(biāo)記、分子量較小和目標(biāo)分子廣泛等優(yōu)勢(shì)。隨著研究不斷深入，以適配體靶向納米遞送系統(tǒng)在腫瘤治療中將會(huì)有廣闊的應(yīng)用前景。

申請(qǐng)人在增加熊果酸靶向性研究中發(fā)現(xiàn)，抗癌活性藥物熊果酸與適配體在水和DMSO所組成的共溶性體系中通過酰胺鍵偶聯(lián)，利用溶劑交換法來制備無載體納米粒，得到治療腫瘤轉(zhuǎn)移的適配體和熊果酸偶聯(lián)靶向藥物，在腫瘤轉(zhuǎn)移方面的效果顯著性提升。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種核酸適配體-熊果酸的偶聯(lián)物無載體自組裝納米粒及其制備和應(yīng)用。該無載體偶聯(lián)物納米粒極大提高了熊果酸在腫瘤轉(zhuǎn)移方向治療的效果，有效控制腫瘤的遷移，抑制腫瘤細(xì)胞粘附和侵襲，從而達(dá)到有效地防止和控制抗腫瘤轉(zhuǎn)移的目的。

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：