[發明專利]一種核酸適配體?熊果酸的偶聯物無載體自組裝納米粒及其制備和應用

在審

• 申請號: 201710586279.X
• 申請日: 2017-07-18
• 公開（公告）號: CN107349429A
• 公開（公告）日: 2017-11-17
• 發明（設計）人: 邵敬偉;郭燕;許愛笑
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: A61K47/54
• 分類號: A61K47/54;A61K31/56;A61K49/00;A61P35/04
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊,李翠娥

1.一種核酸適配體-熊果酸的偶聯物無載體自組裝納米粒在制備抗腫瘤轉移藥物中的應用，其特征在于：將氨基化的核酸適配體和熊果酸在水和DMSO所組成的共溶性體系中通過酰胺鍵偶聯，利用溶劑交換法制得無載體自組裝納米粒，粒徑為120-180nm；

所述的核酸適配體為HER2適配體，其序列為5′-AAC CGC CCA AAT CCC TAA GAG TCTGCA CTT GTC ATT TTG TAT ATG TAT TTG GTT TTT GGC TCT CAC AGA CAC ACT ACA CACGCA CA-3′；

核酸適配體-熊果酸的偶聯物無載體自組裝納米粒的制備方法包括以下步驟：

1）將一定量的熊果酸溶解于DMSO中，得溶液A；往溶液A中依次加入EDC和NHS，于室溫攪拌一段時間制得溶液B；

2）在磁力攪拌條件下將氨基化的核酸適配體緩慢加入到溶液B中，于室溫條件下避光攪拌反應16 h后，調pH至中性；然后將上述混合液置于截留分子量為1000的透析袋中，連續透析3天，透析得到的產物再置于截留分子量為25000的透析袋，連續透析3天，冷凍干燥后得到熊果酸-核酸適配體偶聯物；

3）將熊果酸-核酸適配體偶聯物溶于良性溶劑，得溶液C；將溶液C緩慢滴入至攪拌中的不良溶劑中，攪拌、超聲后得溶液D；

4）將溶液D中的良性溶劑吹干，剩余物經冷凍干燥后即可得核酸適配體-熊果酸的偶聯物無載體自組裝納米粒；

步驟3）中，所述的良性溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、正丙醇、甲醇、吡啶、乙酸和二甲基亞砜中的一種或多種的混合；所述的不良溶劑為磷酸鹽緩沖液、水、生理鹽水和葡萄糖溶液一種或多種的混合；

步驟3）中，攪拌的時間為1.5h-2h，超聲的時間為20min；

步驟3）中，溶液C與不良溶劑的體積比為：1:10-1:100，熊果酸-核酸適配體偶聯物在溶液D中的濃度為100μM-2000μM。