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[發(fā)明專利]巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記及其應用和檢測方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201710585867.1 申請日: 2017-07-18
公開(公告)號: CN107267632B 公開(公告)日: 2019-11-01
發(fā)明(設計)人: 冉春;于士將;羅忍;潘琦;王翠倫;侯棟元;叢林;劉浩強;李鴻筠 申請(專利權)人: 西南大學
主分類號: C12Q1/6888 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
代理公司: 重慶市前沿專利事務所(普通合伙) 50211 代理人: 鄒曉艷
地址: 400712*** 國省代碼: 重慶;50
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 巴氏新小綏螨 菌素 抗性 分子 標記 及其 應用 檢測 方法
【權利要求書】:

1.巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記,該分子標記的核苷酸序列如SEQ IDNo.3所示。

2.權利要求1所述分子標記在巴氏新小綏螨對阿維菌素敏感品系和抗性品系非診斷目的分類中的應用。

3.檢測權利要求1所述分子標記的正反向引物,其特征在于:所述引物序列如下:

4F:5’- AAACGAAACGGGCTACTGT- 3’;

4R:5’-CTTCTGCGTGGACTCGTTA-3’。

4.一種巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記的非診斷目的檢測方法,其特征在于:先提取待測巴氏新小綏螨的總DNA,以總DNA為模板用權利要求3中的正反向引物進行PCR擴增,得到包含突變區(qū)域的NbGluCl基因片段,將得到的基因片段與權利要求1中的巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記進行序列比對,即可判斷該品系是對阿維菌素的敏感品系還是抗性品系。

5.根據(jù)權利要求4所述的巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記的非診斷目的檢測方法,其特征在于:所述PCR擴增的反應體系為:PCR Master Mix 25μL,正反向引物各2μL,待測樣本DNA模板50~100ng,補充ddH2O至50μL。

6. 根據(jù)權利要求4或5所述的巴氏新小綏螨對阿維菌素抗性的分子標記的非診斷目的檢測方法,其特征在于:所述PCR擴增的程序為:94℃預變性3min;然后94℃變性30sec,58℃退火30sec,72℃延伸1 min,35個循環(huán);最后72℃延伸5min。

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